【摘要】 目的檢測伏牛山區青翹與老翹藥材質量。方法《中國藥典》方法測定青翹與老翹藥材的水分、灰分、水浸出物、醇浸出物，分光光度法測定總黃酮含量，高效液相色譜（HPLC）法測定連翹苷含量。結果伏牛山區青翹與老翹藥材的水分、灰分、水浸出物、醇浸出物含量均達到《中國藥典》標準，老翹中連翹苷含量低于《中國藥典》標準。結論伏牛山區青翹與老翹藥材的質量不同。

【關鍵詞】 青翹 老翹 質量 檢測

連翹為木樨科連翹屬植物連翹Forsythia suspensa (Thunb.)Vahl的干燥果實，主產于河南、山西、陜西。連翹作為一種傳統常用清熱解毒中藥，味苦， 性微寒， 歸肺、心、小腸經，具有清熱解毒、散結消腫， 利尿排石等功能?，F代藥理研究證明， 連翹具有抗菌、抗炎、解熱、鎮吐、利尿強心、抗肝損、鎮痛、抗內毒素、抗病毒、降血壓等作用。連翹根據其采收期不同，可分為青翹和老翹兩種。果實初熟尚帶綠色時采收，用沸水煮片刻或蒸熟后曬干，習稱“青翹”；果實熟透時采收曬干，習稱“老翹”。傳統經驗一直認為老翹好于青翹。近來又有研究表明，以連翹苷為指標比較青翹與老翹的質量，青翹質量優于老翹。為了更好地比較兩者孰優孰劣，本實驗以河南伏牛山區產的連翹藥材為研究對象，對兩者質量進行檢測?，F報道如下。

1 儀器與材料

1.1 儀器電恒溫水浴鍋（鞏義市英峪予華儀器廠）；SHZ-C型循環水使用多功能真空泵（鞏義市英峪豫華儀器廠）；TP300型超聲機（天鵬電子新技術有限公司）Waters600-2487；高效液相色譜儀（waters公司）；7521紫外-可見分光光度計（上海精密儀器廠）。

1.2 試劑連翹苷對照品（購于中國藥品生物制品檢定所，批號：110821-200609）；蘆丁對照品，自制，純度達98%以上；甲醇色譜純（天津克密歐）；乙腈色譜純（天津克密歐）；其他試劑均為分析純。

1.3 藥材采自欒川伏牛山區，經本教研室鑒定為連翹Forsythia suspena (Thunb．)Vahl的干燥果實。

2 方法與結果

2.1 水分、灰分、酸不溶灰分及浸出物含量測定［1］結果見表1。

表1 連翹藥材水分、總灰分及浸出物含量測定結果（略）

2.2 總黃酮含量的測定［2］

2.2.1 對照品溶液的制備精密稱取蘆丁對照品10.200 0 mg，以甲醇溶解并定容于100 ml容量瓶中，配制成0.102 mg/ml的對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備精密稱取連翹藥材粉末（過2號篩）適量，置于150 ml錐形瓶中，加20倍量甲醇，稱重，在超聲儀中超聲提取30 min，稱重，補足重量。離心，取上清液作供試品。

2.2.3 顯色劑的制備稱取三氯化鋁9 g置于燒杯中，加入適量甲醇，用玻璃棒不斷攪拌，使之溶解，然后轉移至100 ml容量瓶中，以甲醇定容至刻度，搖勻，即為5%三氯化鋁甲醇溶液。

2.2.4 標準曲線的繪制分別精密吸取該溶液0.5，1.0，1.5，2.0，2.5 ml，置10 ml容量瓶中，加入5%的三氯化鋁甲醇溶液1 ml顯色，定容。以甲醇為空白對照，于425 nm處測其吸光度。以A值為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線，即C=0.046A-0.000 9，r=0.999 3，表明蘆丁標準品在0.005 8～0.029 mg/ml濃度內呈現良好線性關系。

2.2.5 含量測定 吸取供試品溶液適量，按“2.2.4”項下方法測定吸光度值，用標準曲線法求含量。結果見表2。

表2 青翹和老翹的總黃酮含量（略）

2.3 連翹苷含量測定

2.3.1 色譜條件色譜柱：sunfire C18(150 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相乙腈∶水∶醋酸=25∶75∶0.04；流速1.0 ml/min；檢測波長277 nm；柱溫：室溫；外標峰面積法定量。

2.3.2 對照品溶液的制備精密稱取連翹苷對照品適量，加甲醇配制成0.086 mg/ml的溶液。

2.3.3 供試品溶液的制備精密稱取連翹適量(同時另取樣按《中國藥典》I部附錄Ⅸ H第2法測定水分)，置于索氏提取器中，加20倍量甲醇，提取1 h，過濾，回收溶劑至干，殘渣用甲醇定容，過0.45μm濾膜，作供試品溶液。

2.3.4 標準曲線的繪制精密吸取對照品溶液，稀釋成系列濃度的溶液，按“2.3.1”色譜條件，進樣20 μl，測定峰面積，平行3次，以峰面積平均值對進樣量進行線性擬合，得連翹苷的回歸方程為Y = 1E+07X + 204 88，r=0.999 4。表明連翹苷進樣量在0.43～3.44 μg時，線性關系良好。

2.3.5 精密度實驗取對照品溶液，連續進樣5次，測定連翹苷峰面積RSD=1.09%。

2.3.6 重現性實驗分別精密稱取5份樣品，按“2.3.3”處理得樣品溶液，進樣分析，測得連翹苷峰面積的RSD=0.66%。

2.3.7 穩定性實驗取同一供試品溶液，分別在0.5，1，2，3 h測定，計算連翹苷峰面積RSD=0.68%，結果表明連翹苷峰面積在3 h內穩定。

2.3.8 加樣回收率實驗取已知含量樣品，精密稱取5份，分別加入不同量的對照品，按“2.3.3”項制備樣品溶液，測定含量，計算回收率，結果平均回收率98.04%，RSD=1.49%。

2.3.9 含量測定吸取供試品溶液，進樣20 μl，測定樣品中連翹苷峰面積，外標法計算含量。結果見表3。

表3 伏牛山青翹與老翹中連翹苷的含量測定（略）

3 討論 由表1可知，青翹與老翹的水分符合《中國藥典》（2005年版）不得過10.0%的規定；總灰分檢測結果均不超過4.0%為合格，說明沒有其他無機物污染和摻雜；酸不溶性灰分檢測結果均未超過1.0%符合《中國藥典》標準。 總黃酮、連翹苷含量測定結果表明，青翹中總黃酮、連翹苷含量都高于老翹，且老翹中連翹苷含量低于《中國藥典》標準。因此青翹和老翹應該進行區別使用。關于青翹與老翹的藥效差異，有待通過藥理進一步研究。 通過本實驗表明青翹與老翹水分、總灰分、酸不溶性灰分雖然都符合藥典標準，但兩者又有明顯不同。從其主要成分總黃酮和連翹苷來看，青翹質量優于老翹，可能與連翹的采收時間和初加工有關，本實驗為連翹的最佳采收期提供了參考。

【參考文獻】 ［1］ 國家藥典委員會．中國藥典，Ⅰ部［S］.北京：化學工業出版社，2005：127. ［2］ 張 果，李發榮，段 飛，等.不同采收期連翹葉中連翹苷、連翹酯苷和蘆丁的含量測定［J］.天然產物研究與開發，2005，17（6）：790.