【摘要】 目的 對辣椒堿納米乳注射劑進行溶血性與血管刺激性評價。方法 采用家兔體外溶血性試驗與家兔體內血管刺激性試驗。結果 0.004%辣椒堿納米乳注射劑3 h內無溶血以及無紅細胞凝集反應，按20 μg/kg家兔耳緣靜脈注射無血管刺激性。結論 在有效劑量下辣椒堿納米乳注射劑無溶血及血管刺激性反應，為進一步研究提供參考。

【關鍵詞】 辣椒堿;納米乳;注射劑;溶血性;血管刺激性

Abstract:Objective To evaluate the hemolysis and vascular irritation of nanoemulsion Injection of capsaicin.Methods Experiments including in vitro hemolytic test in rabbits and in vivo vascular irritation test in rabbits were carried out.Results Hemolysis and erythrocyte agglutination were not observed in in vitro test after adding 0.004% capsaicin nanoemulsion for 3 hours. Vascular irritation in rabbits was not observed also after intravenous administration of the preparation at the dosage of 20 μg/kg.Conclusion There was no hemolysis and vascular irritation reactions concerned with nanoemulsion injection of capsaicin at the effective dosage in rabbits.

Key words:capsaicin; nanoemulsion; injection; hemolysis; vascular irritation

辣椒堿(capsaicin)[1]是辣椒辛辣物質和具有藥物活性的主要成份，通過選擇性拮抗神經肽P物質而發揮抗炎鎮痛效果[2]，可有效治療帶狀皰疹后遺神經痛、糖尿病神經痛、風濕性關節炎和骨關節炎等疼痛，是新型非成癮性抗炎鎮痛藥[3]。由于療效肯定，美國藥典從24版開始收載。將辣椒堿制成納米乳注射劑，達到起效快、鎮痛時間長、副作用低的目的，克服市場上辣椒堿皮膚局部用制劑的起效慢、藥物吸收不完全、皮膚刺激性大的缺點[4～6]。

根據《中國藥典》2005版中藥安全性檢查法應用指導原則與國家食品藥品監督管理局制定《化學藥物刺激性、過敏性和溶血性研究技術指導原則》，采用溶血性與血管刺激性試驗對辣椒堿納米乳注射劑進行臨床前安全性評價，為進一步研究提供依據。

1 儀器、試藥與動物

1.1 儀器

JB2型恒溫磁力攪拌器(上海智光儀器儀表有限公司)，十萬分之一電子分析天平(BP211D，德國賽多利斯)，800型電動離心機(廣州富城儀器廠)，數顯恒溫水浴鍋(金壇市富華儀器有限公司)。

1.2 試藥

0.004%辣椒堿納米乳注射劑(自制)，空白納米乳(自制)，生理鹽水(自制)。

1.3 動物

新西蘭家兔，普通級，體質量2.0～2.5 kg，雌雄各半，由廣東省醫學實驗動物中心提供(合格證號：0044303)。

2 方法與結果

2.1 辣椒堿納米乳注射劑的制備

依據辣椒堿納米乳處方設計與工藝研究，得辣椒堿納米乳由MCT：吐溫80：豆磷脂：丙二醇按質量比為1.5∶2.5∶1.25∶1.5組成。按處方量稱取藥物、油、復合乳化劑、助乳化劑，50 ℃水浴加熱溶解，得均勻透明的溶液;在磁力攪拌下，將常溫蒸餾水傾入該溶液乳化30 min，形成淡黃色、澄清透明辣椒堿納米乳。0.22 μm微孔濾膜過濾，灌封于2 mL安瓿，121 ℃、0.1 MPa熱壓滅菌15 min。

2.2 溶血試驗[7～11]

2.2.1 紅細胞混懸液的制備

兔紅細胞混懸液：取新西蘭家兔，耳緣靜脈取血約15 mL，用玻棒輕輕攪動血液以除纖維蛋白原，使成脫纖血液。加入生理鹽水約10倍量，搖勻，2 000 r/min離心10 min，除去上清液，沉淀的紅細胞再用生理鹽水按上述方法洗滌3～4次，直至上清液不顯紅色為止，按所得紅細胞容積用生理鹽水配成2%兔血紅細胞混懸液，備用。

人紅細胞混懸液：6名志愿者，每人抽血約8 mL，同法處理得2%人血紅細胞混懸液，備用。

2.2.2 溶血試驗

取潔凈試管7支，1～5號管為供試品，按表1依次加入2%兔或人血紅細胞混懸液、生理鹽水、0.004%辣椒堿納米乳注射劑(供試1)或空白納米乳(供試2);6號管為陰性對照;7號管為陽性對照。混勻1～7號管，置(37±0.5) ℃恒溫水浴箱中溫育。3 h后觀察溶血與凝集現象，按表2判斷是否溶血，結果見表3。表1 辣椒堿納米乳注射劑溶血試驗加樣表表2 溶血試驗判斷標準現象結果紅細胞全部下沉，上層液無色澄明無溶血溶液澄明紅色或棕紅色，管底有少量紅細胞殘留部分溶血溶液澄明紅色，管底無紅細胞殘留全溶血溶液中有棕紅色或紅棕色絮狀沉淀，搖勻后不分散紅細胞凝聚表3 辣椒堿納米乳注射劑溶血試驗結果

結果表明，7號陽性對照管液體澄明鮮紅色，管底幾乎無紅細胞殘留，為全溶血;6號陰性對照管上層液無色澄明，紅細胞逐漸沉于管底，顏色呈鮮紅色，輕輕振搖后管底沉積的紅細胞均能完全分散，為無溶血;兔或人血紅細胞的1～5號各濃度辣椒堿納米乳供試管(供試1)、空白納米乳供試管(供試2)上層液無色澄明，紅細胞逐漸沉于管底，輕搖后紅細胞能完全分散，表明無溶血及無紅細胞凝集反應。但辣椒堿納米乳注射劑與空白納米乳使紅細胞呈紫紅色，與陰性對照的鮮紅色不一致，此原因尚待查明。