作者：謝清春，陳燕忠，呂竹芬，申樓

【關鍵詞】 西替偽麻緩釋片 摘要:目的 建立高效液相色譜法測定西替偽麻緩釋片中西替利嗪在Beagle犬體內血藥濃度并進行生物利用度評估。方法 以二氯甲烷提取溶劑，異丙嗪為內標；采用C18柱，以乙腈0.02 mol/L的醋酸鈉水溶液高氯酸三乙胺(體積比50∶50∶0.5∶0.1)，用5 mol/L的氫氧化鈉調節pH 5.2為流動相，檢測波長230 nm。結果與結論 本文方法提取率高，回收率好，自制片的相對生物利用度93.0%。 關鍵詞:西替偽麻緩釋片；高效液相色譜法；藥代動力學；生物利用度 Abstract: Objective To establish an HPLC assay for the determination of blood plasma concentration of cetirizine in cetirizinepseudoephedrine sustainedrelease tablets in beagle dogs.Method Cetirizine was extracted by methylene chloride. Promethazine was used as an internal standard and the separation was performed on a reversed phase Diamonsil C18 (5 μm，250 mm×4.6 mm) employing a UVdetection set at 230 nm at ambient temperature. The mobile phase consists of acetonitrile0.02 mol/L acetate water solutionperchloric acidtriethylamine (50∶50∶0.5∶0.1) adjusted to pH 5.2 with 5 mol/L NaOH. Result and Conclusion The assay is linear from 50 to 3200 ng/ml with a detection limit of 15 ng/ml. The relative bioavailability of cetirizine in the tablets was 93.0%. Key words:cetirizinepseudoephedrine sustainedrelease tablets; HPLC; pharmacokinetics; bioavailability 鹽酸西替利嗪（cetirizine，CTZ）是第二代抗組胺藥，鹽酸偽麻黃堿為減鼻充血劑，兩者合用藥可以用于治療季節性，過敏性鼻炎。西替偽麻緩釋片通過含5mg鹽酸西替利嗪的速釋層及含120mg鹽酸偽麻黃堿的緩釋層，在保持鹽酸西替利嗪起效迅速的同時減少了鹽酸偽麻黃堿的給藥次數（1天2次）。西替偽麻緩釋片中鹽酸偽麻黃堿的藥動學研究已有報道［1］，為了評價自制西替偽緩釋中鹽酸西替利嗪的藥動學和相對生物利用度，本文在Beagle犬體內進行了生物利用度試驗。文獻報道鹽酸西替利嗪血藥濃度測定方法有高效薄層色譜法［2］，高效液相梯度洗脫法［3］，本文結合實際條件建立了恒流條件下反高效液相色譜法測法測定鹽酸西替利嗪在Beagle犬體內血漿藥物濃度。 1 儀器與試劑 Dionex P680 HPLC Pump（Dionex Corp.），Dionex UVD170U（Dionex Corp.），WH―3微型渦漩混合儀(上海滬西分析儀器廠)，BA110S電子天平(德國，Sartorius)，821型袖珍離子式pH計(中山大學電子廠)，TDL-60B臺式離心機(上海安亭科學儀器廠)。鹽酸西替利嗪（麗珠制藥廠），鹽酸異丙嗪針劑(上海禾豐制藥有限公司)，肝素(常州市新華活性材料研究所)，ZyrtecD（輝瑞公司，每片含鹽酸西替利嗪5mg，鹽酸偽麻黃堿120 mg），西替偽麻緩釋片（自制），二氯甲烷(色譜純，依能色譜有限公司)，三乙胺(分析純，汕頭市光華化學廠)，乙腈(色譜純，依能色譜有限公司)。 2 實驗方法 1.1 CTZ的體內分析方法 1.1.1 色譜條件 色譜柱：DiamonsilTM C18柱(5 μm，250 mm×4.6 mm)，流動相：乙腈0.02 mol/L的醋酸鈉水溶液高氯酸三乙胺(體積比50∶50∶0.5∶0.1)以5 mol/L NaOH調節pH 5.2，檢測波長230 nm，靈敏度0005AUFS，進樣體積50 μL。 1.2 樣品處理方法 吸取0.5 mL血漿于5 mL具塞離心管中，加入50 μL的內標標準液，渦漩振蕩30 s，加入5 mL的二氯甲烷［3，4］，渦漩振蕩1 min，于5 000 r/min離心10 min。棄去上層水相和蛋白，將下層有機相轉移至另一5 mL離心管中，于40 ℃水浴，氮氣流下揮干。殘留物加入100 μL流動相，渦漩振蕩30 s，5 000 r/min離心3 min，精密量取50 μL進樣。 1.3 系統適用性和專屬性試驗 將空白血漿和加入藥物及內標的血漿按“樣品處理方法”處理進樣，結果見圖1，2。在本實驗條件下血漿內源性物質對測定無干擾，CTZ的保留時間為4.9 min，內標的保留時間為12 min，分離度好，理論塔板數均大于3 000，柱效高。 1.4 標準曲線的制定 精密稱取真空干燥至恒重的CTZ 20.0 mg于200 mL容量瓶中，并加水至刻度得濃度為100 μg/mL的CTZ儲備液。依次吸取儲備液0.125、0.25、0.5、1、2、4、8 mL至25 mL容量瓶中，加水至刻度，得CTZ的系列標準液。另將異丙嗪注射劑一支2 mL(含異丙嗪50 mg)轉移至500 mL容量瓶中［5］，加水至刻度，將此溶液稀釋10倍得到10 μg/mL的內標標準液。所有儲備液和標準液均存儲于4 ℃備用。 取0.5 mL空白血漿于5 mL具塞離心管中，加入50 μL的CTZ上述系列標準液和50 μL的內標標準液，得到含CTZ 50、100、200、400、800、1 600、3 200 ng/mL的血漿樣品，以下操作同“樣品處理方法”，以CTZ面積(Ai)比內標峰面積(As)的比值對質量濃度（ρ）回歸得回歸方程：Ai/As=0.0011ρ+0.0367，r=0.9997，表明線性關系良好。 1.5 回收率試驗 1.5.1 相對回收率 取5 mL具塞離心管，加入空白血漿0.5 mL，精密加入CTZ不同濃度標準液和內標標準液各50 μL，使血漿中CTZ低、中、高3個濃度分別為100 ng/mL，1 600 ng/mL，3 200 ng/mL，按“樣品處理方法”項下操作，由標準曲線計算測得量，計算回收率，結果見表1。表1 CTZ相對回收率試驗結果（略）