作者：趙培西， 謝艷華， 王劍波， 李慧， 沈薇， 賀中民， 王四旺

【關鍵詞】 生地降糖膠囊；，，糖尿病；，，四氧嘧啶；，，小鼠；，，血糖

摘要：目的研究生地降糖膠囊對四氧嘧啶誘導的糖尿病小鼠血糖、體質量及血脂的影響。方法小鼠以60 mg/kg尾靜脈注射四氧嘧啶生理鹽水溶液造成糖尿病模型，形成糖尿病模型后隨機分為6組，連續i.g.給予生地降糖膠囊21 d，觀察用藥前后小鼠的一般情況，每7 d給藥后4 h眼后靜脈叢采血，分別測定血糖、總膽固醇和甘油三酯含量。結果生地降糖膠囊能明顯改善糖尿病小鼠的精神狀況，增加小鼠體質量(P<0.001)；給藥7 d后，大、中劑量組對四氧嘧啶誘導的糖尿病小鼠即有明顯的的降血糖作用(P<0.01)；給藥21 d后，大、中劑量組有緩和的降低總膽固醇、甘油三酯含量的作用(P<0.05)。結論生地降糖膠囊具有降血糖、增加糖尿病小鼠體質量和調節血脂的作用。

關鍵詞：生地降糖膠囊； 糖尿病； 四氧嘧啶； 小鼠； 血糖

現代醫學所稱糖尿病，中醫文獻中雖然無此病名，但就其臨床所見癥狀和體征，可歸屬于“消渴”范疇。生地降糖膠囊是在傳統古方地黃牛膝丸的基礎上經過現代科學工藝研究而成的6類新藥［1，2］。本方由生地黃和懷牛膝兩味藥組成，采用的地黃為玄參科多年生草本植物地黃Rehmannia glutinosa Libosch.的新鮮或干燥塊根和同為河南產的莧科植物牛膝Achyranthes bidentata Bl.的根。地黃是治療“消渴”的經典中藥之一，如六味地黃丸等。地黃中主要的降血糖成分有梓醇、地黃低聚糖(ROS)等。有文獻報道［3］ROS i.g.給藥100 mg/kg對四氧嘧啶誘導的糖尿病小鼠有良好的降血糖作用。

1 材料與儀器

1.1 藥品與材料生地降糖膠囊由中國人民解放軍第四軍醫大學藥學系藥物研究所植物化學實驗室提供，批號20050408；糖脈康顆粒，成都中匯制藥有限公司，批準文號：國藥準字Z10970026，產品批號：050602；格列本脲片(優降糖)，山東博山制藥有限公司，批準文號：國藥準字H37021769，產品批號：040029；四氧嘧啶(Alloxan)，美國Sigma化學公司出品，批號：A7413，Lot122H33211。葡萄糖試劑盒，產品注冊號：國食藥監械(準)字2004第3400196號，批號：240131；膽固醇試劑盒，產品注冊號：國食藥監械(準)字2004第3400202號，批號：251131；甘油三酯試劑盒，產品注冊號：國食藥監械(準)字2004第3400198號，批號：220231，試劑盒均由中生北控生物科技股份有限公司生產。

1.2 儀器日立KY2000 clinical Spectrophotometer半自動生化分析儀，型號：16F0010，批號：NO.1602006；TDZ 5.40多管架自動平衡離心機，湖南儀器儀表總廠興華儀器廠；DT2000電子天平，(86)量制京字00000137，北京醫用天平廠；琴島LIEBHERR冰箱，型號：BD184。

1.3 動物昆明種小鼠276只，體質量為17～23 g，由中國人民解放軍第四軍醫大學實驗動物中心提供，質量合格證號：醫動字第05236號。

1.4 飼養環境每組6~8只分籠飼養于IVC系統內，室溫(24±2)℃，相對濕度40%~60%，人工控制晝夜各12 h，供以標準鼠飼料，自由飲水，換墊料1次/d。

2 方法

2.1 模型建立取昆明種小鼠276只，雌雄各半，在實驗動物室適應48h。禁食不禁水4 h后，稱體質量作標記。從中隨機留取48只作為正常對照組，雌雄各半。剩余正常昆明種小鼠禁食不禁水12h后，尾靜脈注射0.6% Alloxan 60 mg?kg1（臨用前用生理鹽水配制）［4］，72 h后禁食不禁水4 h，機抽取造模和正常小鼠各12只測血糖值，觀察造模情況。

2.2 藥物配制生地降糖膠囊藥粉配成3.8%，1.9%，0.95%大、中、小3個劑量的供試藥液。糖脈康顆粒配成19.5%供試藥液。格列本脲片(優降糖)配成0.05%供試藥液。

2.3 分組、給藥與指標檢測將觀察造模后剩余的216只Alloxan糖尿病小鼠，隨機分為6組，每組36只(12×3組)，分別為：模型組、糖脈康顆粒組(3.9 g/kg)、優降糖組、生地降糖膠囊大、中、小劑量組(0.78，0.39，0.195 g/kg)。每組12只，雌雄各組均分。模型組ig10 ml/kg蒸餾水，各給藥組均ig 1 ml/kg供試藥液。每日9：00左右ig給藥，連續3 d，每3天后稱體質量，記錄稱重結果，按新體質量調整藥量。每7天隨機抽取每組12只，雌雄各半，眼眶靜脈叢采血后處死，血漿在4℃冰箱保存2 h促凝，分離血清20℃凍存。以葡萄糖氧化酶法測定血糖。直至給藥第21 天后眼眶靜脈叢采血后全部處死。用半自動生化分析儀測定各時間點血糖(GLU)，測定第21 天時總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平。

2.4 統計學處理結果以 ±s表示， 進行組間t檢驗，采用SPSS10.0。統計學軟件進行統計分析。

3 結果

3.1 觀察造模的結果實驗結果表明，與正常組小鼠比較，模型組小鼠血糖值明顯升高(P<0.001)，說明模型制備成功。結果見表1。

3.2 對血糖的影響各造模組與正常組小鼠比較血糖值均顯著升高(P<0.001)，說明模型穩定可靠。給藥后第7天生地降糖膠囊大、中劑量組和優降糖組與模型組比較血糖明顯下降(P<0.05)。第14天生地降糖膠囊大、中、小劑量組和糖脈康顆粒組及優降糖組血糖值均降低，與模型組比較，具有明顯統計學意義(P<0.05)，其中大、中劑量組和優降糖組有顯著的降血糖作用(P<0.001)。給藥后第21天生地降糖膠囊大、中、小劑量組和優降糖組血糖值均降低，與模型組比較具有顯著的統計學意義(P<0.001)。結果見表2。

3.3 對體質量的影響生地降糖膠囊大、中、小劑量組和糖脈康顆粒組對動物體質量的影響與模型組比較有明顯差異(P<0.05，0.001)。結果見表3。

3.4 對血脂的影響造模后21 d甘油三酯已有明顯升高(P<0.001)，但總膽固醇升高不明顯，生地降糖膠囊大劑量組能明顯降低甘油三酯含量(P<0.01)，同優降糖一致，中劑量組則有緩和的調節甘油三酯作用，結果見表4。

表1 四氧嘧啶誘導糖尿病小鼠模型結果（略）

模型組與正常組比較，△△△P<0.001

表2 生地降糖膠囊對糖尿病小鼠血糖的影響（略）

與正常組比較，△△△P<0.001; 與模型組比較，**P<0.05，***P<0.001

表3 生地降糖膠囊對糖尿病小鼠體質量的影響（略）

與正常組比較，△△P<0.01，△△△P<0.001；與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001

表4 生地降糖膠囊對糖尿病小鼠血清膽固醇和甘油三酯的影響（略）

與正常組比較，△△△P<0.001；與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

4 討論

糖尿病祖國醫學稱為“消渴”范疇，其發病機制是燥熱傷陰，導致陰津虧耗。總的治療大法是滋陰清熱，潤燥生津。生地降糖膠囊是根據這一原理在傳統古方基礎之上經過現代工藝研制而成的新制劑，其功用為養陰生津，活血化瘀。糖尿病病人由于糖代謝紊亂造成高血糖，由于脂肪代謝紊亂表現有高血脂癥，對生地降糖膠囊的實驗研究顯示，四氧嘧啶誘發小鼠產生糖尿病，甘油三酯已有明顯升高，但總膽固醇升高不明顯，這與文獻報道一致［5］。生地降糖膠囊對四氧嘧啶誘導的糖尿病小鼠有降低血糖、增加糖尿病小鼠體質量和調節血脂的作用，其降血糖作用可能與生地黃中的梓醇和ROS有關，調節血脂的作用可能與懷牛膝的活血化瘀有關，而血脂的降低有助于預防糖尿病并發癥的發生。該作用可能是血糖降低后，間接改善脂代謝所致，但有無直接作用尚不能確定，有待進一步實驗研究。

［1］ 明?李時珍.本草綱目，第1冊［M］.北京：人民衛生出版社，1977：475.

［2］ 趙培西，王四旺，王劍波. 牛膝中齊墩果酸提取工藝研究［J］.陜西中醫，2005，26(10)：1099.

［3］ Ruxue Zhang， Jinhuang Zhou， Zhengping Jia，et al. Hypoglycemic effect of Rehmannia glutinosa oligosaccharide in hyperglycemic and alloxan-induced diabetic rats and its mechanism［J］. Journal of Ethnopharmacology.2004， 90，30.

［4］ 徐叔云，卞儒廉.藥理實驗方法學，第2版［M］.北京：人民衛生出版社，1991：1277.

［5］ 蔣國彥.實州糖尿病學［M］.北京：人民衛生出版社，1992：258.