【摘要】 目的探討廣西產山豆根藥材的質量。方法采用雙波長薄層掃描法測定山豆根中氧化苦參堿的含量。結果氧化苦參堿的點樣量在2.268～11.340 μg范圍內，點樣量與斑點峰面積積分值具有良好的線性關系（r=0.997 43，n=5）。氧化苦參堿的平均回收率為99.81%，RSD=1.03%。4個不同產地山豆根中氧化苦參堿的含量差異不大。結論實驗為制定廣西山豆根的質量控制方法提供了依據。

【關鍵詞】 山豆根；氧化苦參堿；薄層掃描法; 質量分析

山豆根為較常用中藥，始載于宋《開寶本草》。蘇頌謂“山豆根，生劍南及宜州、果州，今廣西亦有，以忠州、萬州者為佳。苗蔓如立，葉青，經冬不調，八月采根，廣西者如小槐，高尺余……”。目前各地以山豆根為名的藥材不下二十余種之多，其中以華南產的廣豆根和北方產的北豆根應用最為普遍。廣豆根為豆科植物越南槐Sophora tonkinensis Gapnep.的干燥根和根莖，其形態與產地和本草記載相符合，且目前廣銷全國，療效肯定，是現時藥用山豆根的正品［1］。本文采用薄層掃描法測定了廣西百色地區所產的山豆根藥材中的氧化苦參堿的含量，以期為制定山豆根質量標準提供實驗依據。

1 儀器與材料

CAMAG TLC SCANNER3薄層掃描儀（瑞士卡瑪公司）；CAMAG LINOMAT5點樣儀（瑞士卡瑪公司）；939薄層制板機（重慶南岸貝爾德儀器技術廠）。山豆根采自廣西百色地區四縣（樂業、德保、靖西、那坡），經本院蔡毅教授鑒定，均為豆科植物越南槐Sophora tokinensis Gapnep的干燥根和根莖。氧化苦參堿對照品（中國藥品生物制品鑒定所，批號110780—200004）；硅膠G，（青島海洋化工廠產品）；試驗中所用試劑均為分析純。

2 方法

2.1 供試品溶液的制備［2］

分別取山豆根藥材粗粉過40目篩，約0.5 g精密稱定，置索氏提取器中，滴加無水乙醇-濃氨試液（3∶2）混合溶液1 ml使濕潤，放置30 min后，加三氯甲烷80 ml，加熱回流提取4 h，提取液回收三氯甲烷并濃縮至干，殘渣用甲醇溶解并轉移至5 ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，即得。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取氧化苦參堿對照品約5 mg于5 ml容量瓶中，加甲醇至刻度，濃度為1.134 mg/ml。

2.3 層析條件

取硅膠G，加0.7%CMC-Na（11：30），攪拌均勻后，用自動鋪板器鋪板，規格為10 cm×20 cm，厚度0.6 mm，晾干，于110℃活化30 min，置于干燥器內備用。展開劑為氯仿∶甲醇∶氨水（4∶1∶0.3），展開前預飽和30 min，顯色劑為稀碘化鉍鉀試液。

2.4 薄層定性

在同一塊薄層板上，分別點供試品溶液各6 μl，氧化苦參堿對照液4 μl，在上述層析條件下展開，展距8 cm，取出晾干，噴以顯色劑，在可見光下觀察結果，見供試品在相同Rf值處分別與對照品有相同的橙紅色斑點。

2.5 掃描條件

對上述特征斑點進行光譜掃描，結果氧化苦參堿對照品與供試品分別在520 nm波長處有最大吸收，而在650 nm波長處吸收較小。故采用λs=520 nm，λR=650 nm，雙波長直線掃描。

3 結果

3.1 線性關系考察

取氧化苦參堿對照品溶液2，4，6，8，10 μl，按上述條件展開、顯色，掃描測定其峰面積，以對照品溶液的濃度為橫坐標，峰面積積分值為縱坐標，進行回歸，得回歸方程A=1 466.37X+629.97，r=0.997 43。結果表明氧化苦參堿在2.268～11.340 μg范圍內，峰面積與質量濃度呈良好的線性關系。

3.2 精密度實驗

同一斑點連續掃描6次，記錄峰面積，氧化苦參堿的RSD為0.24%

表明精密度良好。同一樣品在同一薄層板不同位置點樣，展開、顯色，記錄峰面積，氧化苦參堿的RSD為1.58%，表明精密度良好。

3.3 重復性實驗

按供試品溶液制備方法處理同一批樣品6份。取氧化苦參堿對照品溶液2 μl、4 μl，各樣品溶液4 μl，按上述條件展開、顯色，掃描測定其峰面積，以外標兩點法計算含量，氧化苦參堿的平均含量為1.546%，RSD為2.22%。

3.4 樣品測定

取氧化苦參堿對照品溶液2 ，4 μl，各供試品溶液4 μl，分別交叉點于同一薄層板上，按上述條件展開、顯色，掃描測定各峰面積，按外標兩點法計算，結果樂業、德保、靖西、那坡四產地山豆根所含氧化苦參堿含量分別為1.418%，1.579%，1.488%，1.620%，均達到2005版《中國藥典》規定的要求。

3.5 加樣回收實驗

取同一批（樂業）山豆根藥材粗粉6份，各約0.1 g，于每份樣品中加入定量氧化苦參堿對照溶液3.5 ml（濃度為0.412 8 mg/ml），按供試品溶液制備項制備供試液，按樣品測定項點樣、展開、顯色，掃描測定各峰面積，計算回收率。結果見表1。表1 加樣回收實驗結果（略）

3.6 穩定性實驗

取一供試品溶液按上述條件展開、顯色，掃描測定其峰面積，以第1次測量時間為零時，以后每隔15 min測量1次，直至1 h，氧化苦參堿展開、顯色后1 h內基本穩定。

4 討論

在實驗中采用薄層色譜法，所用的展開系統經多方選擇確定為本系統，所展出的斑點距離拉得開并且圓整，穩定性較好，利于掃描測定。 本實驗采用薄層掃描法測定，從方法的精密度、重復性、線性關系考察以及加樣回收實驗的結果來看，樣品在點樣范圍內，濃度與峰面積積分值成良好的線性關系，靈敏度較高，重復性好，操作簡單。 樣品的測定結果表明廣西百色地區四縣所產的山豆根藥材中，氧化苦參堿的含量差異不大，由高到低依次為那坡>德保>靖西>樂業。經鑒別上述不同產地山豆根藥材均為同種植物，可能應各地土壤條件不同、采收時間不同而使含量有所差異。

【參考文獻】 ［1］張晶，高淑英.山豆根的藥材品種鑒別［J］.時珍國醫國藥，2006;17(2)242. ［2］國家藥典委員會.中國藥典，Ⅰ部［S］.北京：化學工業出版社，2005:19.