【摘要】 目的對到手香進行毒理學(xué)研究，包括到手香水提液急性毒性實驗和到手香揮發(fā)油急性毒性實驗。方法將到手香水提液以最大濃度4.706 g/ml，最大劑量0.8 ml/20 g對小鼠灌胃給藥，測定到手香水提液對小鼠的最大耐受量。采用霍恩氏（Horn）法，將小鼠隨機分4組，按1.0，2.15，4.62，10.0 ml/kg劑量對小鼠灌胃給藥，測定到手香揮發(fā)油對小鼠半數(shù)致死量。結(jié)果到手香水提液（折算為生藥量）對小鼠最大耐受量：188.2 g/kg，到手香揮發(fā)油對小鼠LD50為：2.37 ml/kg。結(jié)論到手香水提液對小鼠無明顯急性毒性，到手香揮發(fā)油對小鼠有一定的急性毒性。

【關(guān)鍵詞】 到手香 急性毒性 最大耐受量 半數(shù)致死量

Abstract:ObjectiveTo study the acute toxicity of water soluble extract and the volatile oil of Coleus amboinicus Lour.(CAL) in mice.MethodsThe maximum administration dosage (concentration 4.706 g/ml， dose 0.8ml/20g) of the water soluble extract were determined by iq administration in mice. The maximal tolerance dose (MTD) of water soluble extract of CAL to mice was measured. Using Horn's method， mice were randomly pided into four groups and given different doses (1.0， 2.15， 4.62， 10.0 ml/kg). LD50 of volatile oil of CAL to mice was measured. ResultsMTD of water soluble extract of CAL was 188.2 g/kg， and LD50 of volatile oil of CAL was 2.37 ml/kg. ConclusionWater soluble extract of CAL is not acutely toxic to mice， and volatile oil of CAL is acutely toxic to mice in a certain degree.

Key words:Coleus amboinicus Lour.; Acute toxicity; The maximal tolerance dose; LD50 到手香Coleus amboinicus Lour.，別名左手香、印度薄荷，為唇形科鞘蕊花屬植物，原產(chǎn)自印度的拉賈斯坦邦，在印度廣泛栽培，后傳至東南亞，在國外作為一種香料兼藥用植物。

國內(nèi)的《現(xiàn)代中藥大辭典》《中國植物志》《廣東植物志》等均未收錄，郭華仁等［1］將其歸入沒有在臺灣收錄過的原產(chǎn)東南亞觀賞植物目錄中，該植物在廣東民間偶有種植。到手香全草有清涼、消炎、祛風(fēng)、解毒等功效，可用于治感冒、發(fā)燒、扁桃腺炎、喉嚨發(fā)炎、肺炎、寒熱、頭痛、嘔吐瀉泄等；外用于火刀傷；民間還用來治蜂傷、硫酸潑傷、燙傷等。

未查到有資料對到手香的毒理學(xué)進行研究。為給到手香使用提供安全的實驗數(shù)據(jù)，本文對到手香進行毒理學(xué)研究，包括到手香水提液急性毒性實驗（最大耐受量測定）和到手香揮發(fā)油急性毒性實驗（LD50測定）。將到手香水提液濃縮為最大濃度，以最大給藥劑量對小鼠灌胃給藥，在規(guī)定時間內(nèi)觀察小鼠情況，以測定到手香水提物對小鼠的最大耐受量，本文采用霍恩氏［2］（Horn）法，測定到手香揮發(fā)油對小鼠半數(shù)致死量，即 LD50值測定。

1 材料

1.1 藥材及水提液的制備和揮發(fā)油的提取 到手香，2001年引種于陽西縣原中山醫(yī)科大學(xué)藥材基地，在中山大學(xué)校園內(nèi)繁殖。到手香水提液最大濃度濃縮液（稠膏）的制備：取到手香地上部分，晾干剪碎后，精密稱取碎葉， 加一定體積蒸餾水，浸泡后加熱煮沸提取，冷卻后用雙層紗布過濾，濾渣用蒸餾水清洗3次并過濾，棄去濾渣，合并濾液。濾液再用布氏漏斗墊雙層濾紙抽濾，得到濾液為到手香水提液。在溫度為70℃、壓力為-0.08 MPa、轉(zhuǎn)速為60 r/min的條件下，減壓蒸餾濃縮至最大濃度稠膏，并保證稠膏不會凝結(jié)，得到到手香水提液最大濃度濃縮液（稠膏）［3］，濃度為4.706 g/ml。供小鼠最大耐受量實驗用。揮發(fā)油的提取：取到手香地上部分，晾干剪碎后，精密稱取碎葉50.0 g于1 000 ml蒸餾瓶中，加入600 ml蒸餾水，按《中國藥典》規(guī)定的方法揮發(fā)油測定法［4］提得黃色油狀物， 出油率為1.2%。取揮發(fā)油適量， 用食用油稀釋至各個濃度，供霍恩氏法LD50測定用。

1.2 動物昆明小鼠，體重18～22 g，普通級標(biāo)準(zhǔn)，合格證號：粵檢證字第2003A030號，由原第一軍醫(yī)大學(xué)(現(xiàn)更名為南方醫(yī)科大學(xué))實驗動物中心提供。

2 方法

2.1 到手香水提液急性毒性實驗（最大耐受量測定）選擇健康昆明小鼠，體重在18～22 g共20只，雌雄各半，按性別分兩組，每組10只，稱重和標(biāo)記，分開飼養(yǎng)，實驗前和實驗的觀察期內(nèi)，均按正常飼料條件飼養(yǎng)。 灌胃給藥：灌胃給藥小鼠1次，0.8 ml/20 g（到手香水提液濃度 4.706 g/ml）。連續(xù)觀察14 d，詳細(xì)記錄動物的反應(yīng)情況，包括飲食、運動狀況、排泄?fàn)顩r等各個指標(biāo)，計算出總給藥量（折合生藥量g/kg）。

2.2 到手香揮發(fā)油急性毒性實驗 （霍恩氏法LD50測定）選擇健康昆明小鼠20只，體重18～22 g，稱重、標(biāo)記，隨機分4組，每組5只，雌雄分別為2，3只。各組小鼠分別灌胃給藥 0.4 ml/20 g （給藥前禁食16 h，不禁水）。給藥后連續(xù)觀察7 d，詳細(xì)記錄動物的反應(yīng)情況，包括飲食、運動狀況、排泄?fàn)顩r、死亡時間及當(dāng)時狀況等各個指標(biāo)［5］。

到手香揮發(fā)油濃度：用食用油將到手香揮發(fā)油稀釋至各個濃度：0.05，0.1075 ，4.65，10.0 ml/ml，給藥劑量遞增比為1013=2.15，分別為1.0，2.15，4.62，10.0 ml/kg。

3 結(jié)果

3.1 到手香水提液急性毒性實驗（最大耐受量測定）小鼠雌雄各10只給藥后，蜷縮少動，但很快就恢復(fù)正常，小鼠無其它異常行為，7 d無小鼠死亡，且各方面狀態(tài)正常，體重增至24～28 g，14 d后亦無死亡，且各方面狀態(tài)正常，體重增至32～37 g，將小鼠處死，解剖觀察，未見腦、心、肝、肺、脾、腎、胃、腸有肉眼可見的明顯異常，毛色正常。結(jié)果見表1。表1 到手香水提液最大耐受量實驗結(jié)果（略）

小鼠對到手香水提物（折算為生藥量）最大耐受量：4.706 g/ml×0.8 ml/20 g=188.2 g/kg。

3.2 到手香揮發(fā)油急性毒性實驗 （LD50測定）第1組、第2組各有一只在第2天死亡，其余4只除在前兩天活動略為減緩?fù)猓黜椫笜?biāo)均正常，且7 d后亦無死亡；第3組在兩天內(nèi)全部死亡，第4組在3 h內(nèi)全部死亡（結(jié)果見表2）。后兩組動物在給藥后蜷縮少動，進食飲水都大為減少，甚至不進食不飲水，直至死亡未見有掙扎等任何動作，死亡后解剖觀察動物，未見腦、心、肝、肺、脾、腎、胃、腸有肉眼可見的明顯異常，毛色亦正常。 查霍恩氏法LD50值計算用表（劑量遞增法測定LD50值計算用表A1），劑量1＝1.00 ml/kg、劑量2＝2.15 ml/kg，劑量3＝4.65 ml/kg，劑量4＝10.0 ml/kg，組1，組2，組3，組4死亡動物數(shù)為1，1，5，5，對應(yīng)的LD50值為2.37 ml/kg，可信限為1.42～3.95 ml/kg。按到手香揮發(fā)油提取率1.2%折算為生藥，則小鼠對到手香揮發(fā)油（折算為生藥）LD50為197.5 g/kg，可信限為118.3～329.2 g/kg。

4 討論 小鼠對到手香水提液（折算為生藥量）最大耐受量：188.2 g/kg，對動物無明顯急性毒性。按照20 g小鼠與70 kg人的體表面積之比為：387.9（山東中藥學(xué)院《中藥藥理學(xué)實驗講義》1994），轉(zhuǎn)換成人對到手香水提物（折算為生藥量）最大耐受量：1 460.1 g/70 kg，因此可以初步推斷，對人來說到手香水提物無明顯急性毒性。 霍恩氏法測定小鼠對到手香揮發(fā)油LD50值為：2.37 ml/kg，可信限為1.42～3.95 ml/kg。轉(zhuǎn)換成人對到手香揮發(fā)油（折算為生藥量）LD50為：18.39 ml/70 kg，說明到手香揮發(fā)油對人也有一定的毒性。表2 到手香揮發(fā)油急性毒性正式實驗數(shù)據(jù)（略）

到手香作為一個在國內(nèi)沒有收錄而民間有使用的藥用植物，對其毒理學(xué)研究，包括水提液急性毒性實驗（最大耐受量測定）和揮發(fā)油急性毒性實驗（LD50測定），可為到手香使用提供安全的實驗數(shù)據(jù)，對到手香的實際應(yīng)用有著重要的意義。同時這是對到手香進行進一步研究與藥效學(xué)研究提供理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。