作者：宋敏 徐樂勤 蔣宜偉 景明 藺興遙

【摘要】 目的觀察動物口服活血定眩丸的急性毒性和長期毒性反應。方法以最大濃度、最大體積的活血定眩丸灌服小鼠，測定l日最大給藥量。以高、中、低3個劑量的活血定眩丸灌服大鼠連續6周，觀察大鼠的生長發育、血液學、血液生化學、臟器系數、組織病理學變化及停藥后2周上述指標的變化。結果小鼠2次/d灌服活血定眩丸的最大給藥>148.8 g生藥/kg體重， 此劑量相當于臨床成人每日口服劑量0.224 2 g生藥/kg體重的663倍。長期毒性實驗顯示，大鼠攝食量、活動、體重、血液學、生化指標檢查、臟器重量系數、病理學檢查均未見明顯異常，與對照組相比均無明顯差異。結論活血定眩丸的急性毒性和長期毒性實驗均未見有明顯毒性反應。

【關鍵詞】 活血定眩丸 毒理學 急性毒性 長期毒性

Abstract:Objective To observe the acute toxicity of HuoXueDingXuan Pill (HXDX) on mice and its long-term toxicity on rats.MethodsThe maximum administration dosage(MAD) of HXDX was tested by gastric infusion of two times in mice. Three groups of rats were administered with repeated gastric infusion of HXDX for 6 weeks. Body weight， hematological and hematobiochemical parameters， coefficient and histomorphological figure of organs were examined in 6th week and 2 weeks after the cessation of HXDX.ResultsThe maximum tolerance dose in a day was more than 148.8 g/kg(crude drug) which was equivalent to 663 times of clinical daily dosage(0.2242 g/kg). There is no significant difference in food， behavior， weight， hematological and hematobiochemical parameters， coefficient and histomorphological figure of organs between the experimental and the control group. ConclusionToxicity of the drug was not observed in acute or chronic toxicity tests.

Key words：HuoXueDingXuan Pill; Toxicology; Acute toxicity; Long-term toxicity 活血定眩丸是由炙黃芪、生石決明、桑寄生、菊花、天麻等15味中藥組成，具有活血通絡、定眩止痛、補益肝腎的功效。主要用于治療椎動脈型頸椎病引起的頭暈、耳鳴、頸項僵硬、肩背酸痛，手臂麻木等癥，臨床上具有很好的療效。實驗研究表明活血定眩丸能有效改善椎動脈型頸椎病動物模型的血液流變學［1］。為了解該藥的安全性并為臨床用藥提供理論依據，進行了毒理學研究。現報道如下。

1 器材

1.1 動物KM小鼠，SPF級，雌雄各半，體重(20±2)g，合格證號：SCXK（甘）2004-0006-0000025；Wistar大鼠80只，SPF級，雌雄各半，體重(90±10)g，合格證號：SCXK（甘）2004-0006-0000025，由甘肅中醫學院實驗動物中心提供。

1.2 藥物活血定眩丸（由甘肅中醫學院附屬醫院提供，批號070501）因丸劑中含有一定量的輔料，動物實驗配制供試樣品濃度達不到實驗要求的劑量，故采用與丸劑相同工藝方法制得該藥的浸膏（1 g浸膏相當于2.242 g生藥），實驗前用蒸餾水配制成實驗所需濃度用于急性和長期毒性實驗。

1.3 儀器

CD-1200型血細胞分析儀（美國，雅培）；ALCYON 300型全自動生化分析儀（美國，雅培）；電子顯微鏡BX60-32FB3-F01型（日本，OLYMPUS）；切片機RM2135型（德國，徠卡）；全自動組織包埋機TEC-V.CM-JZ型(日本，櫻花)；自動組織脫水劑VIP-JJZ-JZ型（日本，櫻花）。

2 方法與結果［2～4］

2. 1 小鼠急性毒性實驗

2.1.1 方法

經對小鼠預試驗，結果顯示不能測出活血定眩丸劑對小鼠的LD50，故進行對動物的最大給藥量測定。取KM小鼠40只，雌雄各半，按體重隨機分為兩組，分別為給藥組和空白對照組，每組20只。于禁食12 h后（不禁水），給藥組以最大給藥濃度（1.86 g生藥/ml），0.4 ml/10 g體重的給藥體積，對照組以等體積的生理鹽水，灌胃2次/d，間隔6 h，給藥后觀察14 d，記錄動物的死亡及毒副反應癥狀。實驗結束時，將全部動物處死，解剖，肉眼觀察各主要臟器組織病變情況。計算小鼠口服活血定眩丸的最大給藥量。

2.1.2 結果

1日內灌服活血定眩丸148.8 g生藥/kg體重后，動物活動、進食進水、毛發未見任何異常。觀察14 d動物無死亡。肉眼尸檢未見主要臟器組織明顯異常。由此可見，活血定眩丸小鼠口服最大給藥量>148.8 g生藥/kg體重。此劑量相當于臨床成人（按60 kg計）每日口服劑量0.224 2 g生藥/kg體重的663倍。體重變化情況見表1。表1 活血定眩丸對急性毒性實驗小鼠體重的影響(略) 結果顯示，給藥組與對照組小鼠的體重變化無顯著性差異。

2.2 大鼠長期毒性實臉

2.2.1 方法 取Wistar大鼠80只，按體重隨機分為4組，雌雄各半，每組20只，分別為活血定眩丸高、中、低劑量組和空白對照組，給藥量分別為每日22.42，11.21，2.242 g生藥/kg（分別相當于臨床日用藥劑量的100倍，50倍，10倍），給藥體積為1.5 ml/100 g體重，各劑量組用等體積不等濃度給藥，空白對照組給予等體積生理鹽水溶液1次/d，每周給藥7 d，連續灌服6周。給藥前及給藥期間每周稱體重1次，并按平均體重調整給藥劑量，實驗期間每天觀察大鼠一般狀態、體征、攝食量、飲水及糞便狀況。發現有中毒反應的動物應取出單籠飼養，重點觀察。發現死亡或瀕死動物應及時尸檢。于末次給藥結束后24 h，每組取一半的大鼠從腹主動脈取血，檢查血液學和血液生化學指標，取血后，立即剖取腦、心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、睪丸、子宮等臟器稱重，根據體重計算器官重量系數，并對心、肝、脾、肺、腎、腦、胃、小腸、大腸、垂體、脊髓、骨髓、淋巴結、膀胱、睪丸、附睪、卵巢、子宮、胸腺、腎上腺等組織做病理學檢查。

2.2.2 結果

用藥組及對照組大鼠在8周實驗期間均未見異常癥狀，動物的活動、體重、攝食量、大便和毛發光澤程度等未見異常。80只大鼠無一死亡。 活血定眩丸劑對大鼠體重增長的影響：在活血定眩丸連續給藥及停藥恢復期間，各組大鼠體重變化一致，無明顯異常。結果見表2。表2 活血定眩丸劑對實驗大鼠體重的影響(略) 結果顯示，給藥6周及停藥2周后，活血定眩丸各給藥組大鼠體重變化與對照組相似，未見明顯的體重改變。 活血定眩丸劑對大鼠血液學的影響 ：活血定眩丸劑連續給藥42 d時各劑量組大鼠外周血象檢查均在正常范圍。結果見表3。表3 活血定眩丸劑對實驗大鼠血液學的影響(略)

結果顯示，給藥6周及停藥2周后，活血定眩丸各給藥組大鼠各項血液學指標與對照組相似，未見明顯改變。 活血定眩丸劑對大鼠血液生化指標的影響：活血定眩丸劑連續給藥6周及停藥恢復2周時，各劑量組與空白對照組比較無明顯差異。實驗結果見表4。表4 活血定眩丸劑對實驗大鼠血生化指標的影響(略) 結果顯示，給藥6周及停藥2周后，活血定眩丸各給藥組大鼠各項血液生化學指標與對照組相似，未見明顯血液生化學改變。 活血定眩丸對大鼠主要臟器重量系數的影響：連續給藥6周及停藥2周，各組動物體質、臟器質量無顯著性差異，其臟器系數（g/100g體重）亦無顯著性差異。結果見表5。 表5 活血定眩丸對大鼠臟器系數的影響(略)

結果顯示，給藥6周及停藥2周后，活血定眩丸各給藥組大鼠臟器系數與對照組相似，未見明顯的臟器系數改變。 活血定眩丸對大鼠重要器官組織病理形態的影響：連續給藥6周及停藥恢復2周后，放血處死各組大鼠，尸解對臟器進行肉眼觀察未發現異常現象。給藥各組動物各個臟器組織病理切片檢查未見明顯病變（主要臟器的病理切片見圖1～10）。說明活血定眩丸高，中，低3個劑量連續服用6周，對大鼠主要臟器無明顯器質性損傷。

3 結論 活血定眩丸成人臨床每日用量為0.224 2 g生藥/kg體重，小鼠1日口服最大給藥量為148.80 g生藥/kg。相當于成人用量的663倍。表明該藥無明顯急性毒性作用。

活血定眩丸以22.42，11.21，2.242 g生藥/kg體重3個劑量灌胃(分別為成年人臨床日用劑量100，50，10倍)，1次/d，連續給藥6周，與灌胃蒸餾水的空白對照組比較，對大鼠一般狀態(外觀形態、活動、飲食、大便形狀等)、生長發育(體重增大)、外周血象、血液生化、病理學檢查未見明顯毒性作用；停藥恢復2周后亦未見明顯的遲緩毒性反應。實驗結果表明，該藥長期使用不會引起機體結構和功能的改變，無毒副作用，提示按臨床規定的療程、劑量用藥時是安全的。