作者：吳瑜，王樹榮，王根才，劉振斌，羅京

【摘要】 目的 觀察生血寧圍產期給藥對成年小鼠及仔鼠的影響。方法 將試驗小鼠分為生血寧大、中、小劑量組和對照組，在雌性小鼠妊娠后第15 天至分娩后21天連續給藥灌胃給予生血寧，觀察孕鼠圍產期情況、產仔率及仔鼠的生理發育情況、神經反射功能、行為活動及生育能力。結果 仔鼠情況良好，未見明顯異常。結論 生血寧對小鼠無圍產期毒性作用。

【關鍵詞】 生血寧；圍產期；毒性

Abstract:Objective To observe the effects of administration of Shengxuening tablets in perinatal period on neonatal mice and adult mice. Methods The animals were randomized into four groups， i.e.， the group administered at high dose， the group administered at the intermediate dose， the group administered at the low dose， and the control group. The test groups were intragastrically administered with Shengxuening tablets from the 15th day of pregnancy to the 21st day after labour，and conditions of pregnant mice in perinatal period and mouse birthrate， physiological development， nervous reflex， activity， and reproductive ability of the neonatal mice are observed. Results No obvious abnormality was observed in neonatal mice. Conclusion No obvious perinatal toxicity was observed in mouse administered with Shengxuening tablets.

Key words:Shengxuening tablets；perinatal period；toxicity

生血寧系以蠶砂為原料制備的中藥二類新藥，其主要成分為鐵葉綠酸鈉及葉綠素衍生物，主治缺鐵性貧血（氣血兩虛證）［1，2］。臨床試驗表明生血寧對成人、兒童缺鐵性貧血具有良好的療效，且安全性良好［3～5］。為擴大適應人群范圍，給妊娠期婦女用藥提供安全性依據，本實驗以《新藥研制開發生產技術與藥物臨床、非臨床研究管理手冊》［6］為依據對生血寧進行了生殖毒理學研究。其中，圍產期毒性試驗主要側重于研究生血寧對仔鼠安全性的影響，即在圍產期給藥觀察對仔鼠的生理發育、神經反射功能、內臟器官、行為活動及生育能力是否有影響。 1 材料與方法

1.1 動物

SPF級昆明系健康小鼠，雌鼠160只，雄鼠80只，由山東大學實驗動物中心提供，動物許可證號SCXK（魯）20030004，體質量為（25±3）g。動物購入后首先適應性飼養1周，動物交配前按照每飼養籠（面積40 cm×25 cm）放置5只雌性動物規模飼養；動物交配時按照雌雄動物2∶1比例放置過夜。生血寧片由武漢聯合藥業有限責任公司提供，批號20030101。

1.2 方法

1.2.1 給藥方法

將生血寧以蒸餾水配置成混懸液備用。雌性鼠按體質量隨機均衡分為4組，即高劑量組（H）、中劑量組（M）、低劑量組（L）以及空白對照組，分別按質量濃度為2.4％生血寧，0.6％生血寧，0.15％生血寧以及蒸餾水灌胃，灌胃容量均為20 mL/kg，按體質量給藥則高、中、低劑量組分別為480 mg/kg、120 mg/kg、30 mg/kg，分別相當于臨床人用劑量的80倍、20倍及5倍（按公斤體質量折算）。灌胃給藥時間為雌鼠交配妊娠后第15天至分娩后21天。

1.2.2 觀察指標

試驗期間每天觀察雌鼠的一般情況（包括活動、行為、排泄物、背毛、眼睛分泌物等），記錄飲水量、攝食量、死亡數，觀察動物交配行為，計算受孕率。雌鼠受孕后觀察孕鼠體質量變化情況，孕鼠分娩時統計產仔率。

仔鼠出生后24 h內稱量體質量，觀察外觀有無畸形，記錄出生存活率、哺育成活率以及性別比例，并觀察體質量變化。對仔鼠的生理發育指標檢查包括：耳廓分離、門齒萌出、睜眼、腹毛生長、睪丸下降、陰道開口或張開，有無褶耳或開耳孔。神經反射功能檢查包括：翻正反射、痛覺反射、視覺定位反射、聽覺驚愕反射、嗅覺反射、觸須定位反射、斷崖回避反射、瞳孔反射、吸吮能力反射、尾部懸掛反射等。仔鼠斷乳后通過自主活動試驗、轉棒試驗、游泳試驗以及跳臺試驗進行行為測試。仔鼠出生60 d后進行動物交配，觀察雌鼠交配行為并計算雌鼠受孕率。

1.3 統計學方法

計量資料以(±s)表示，采用t檢驗，率的比較用χ2檢驗。

2 結 果

2.1 雌鼠和孕鼠的一般情況

雌鼠妊娠前后一般情況良好，無異常情況出現。生血寧各組及對照組小鼠妊娠受孕率正常，組間比較差異無顯著性（P＞0.05），各組受孕小鼠在用藥前后體質量增長速度正常，組間比較差異無顯著性（P＞0.05），見表1。各組妊娠小鼠產仔率在88.5％～100％之間，生血寧高劑量組的產仔率稍低（88.5％），但組間比較差異無顯著性（P＞0.05）。表1 孕鼠體質量變化情況和雌鼠受孕率、產仔率比較（略）

2.2 仔鼠一般情況

生血寧各組以及對照組仔鼠出生后一日存活率均在98.7％以上，仔鼠外觀未見明顯畸形。生血寧高劑量組的存活率較低（僅指哺乳第21天），但組間比較差異無顯著性（P＞0.05），可能與高劑量組產仔數量多于其他各組，母鼠哺育有一定困難有關。生血寧各組以及對照組仔鼠的性別比例以及體質量增長速度方面未見異常情況，組間比較差異無顯著性（P＞0.05）。見表2。表2 仔鼠在母鼠哺育下成活數量比較（略）

2.3 仔鼠生理發育指標、神經反射功能檢查和行為測試

各組仔鼠生理發育指標檢查以及仔鼠神經反射功能檢查均未見異常。通過隨機抽樣檢測生血寧各組以及對照組斷乳仔鼠心臟、肺臟、脾臟、腎臟、肝臟、生殖器官重量系數未發現異常情況及畸形。通過隨機抽樣檢測生血寧各組以及對照組仔鼠斷乳后行為測試，試驗數據顯示組間比較差異無顯著性（P＞0.05），見表3。表3 仔鼠斷乳后自主活動情況比較（略）

2.4 仔鼠的生殖能力

生血寧各組以及對照組仔雌鼠生后60 d交配后受孕率在60.7％～67.6％之間，組間比較差異無顯著性（P＞0.05），見表4。而且與各親代母鼠受孕率（50.0％～65.0％）比較，似乎親代仔雌鼠受孕率有輕微增高，但差異無顯著性（P＞0.05）。表4 仔雌鼠生后60 d交配后受孕率比較（略）

3 討 論

我國廣大妊娠中晚期孕婦缺鐵性貧血患病率在50%左右［7］，長期以來“孕婦缺鐵不影響胎兒鐵代謝”的習慣思維影響著人們。但有研究證實，孕婦輕度缺鐵時對胎兒鐵代謝沒有影響，但孕婦缺鐵較嚴重時，則可影響胎兒鐵代謝，即孕婦對胎兒的鐵供給是有限的，妊娠期間預防性地給予鐵劑可有效地防治鐵缺乏［7］。 目前治療缺鐵性貧血多采用傳統的口服鐵劑的方法，又以硫酸亞鐵等二價無機鐵鹽和富馬酸亞鐵等有機鐵鹽為代表，對胃部刺激較大。 生血寧的結構和自然血紅素結構極其相似，其功效成分——鐵葉綠酸鈉的結構與血紅素相似，通過腸絨毛上的血紅素受體，血紅素鐵可以被直接吸收，吸收率約20%～25%［8，9］，而非血紅素鐵和無機鐵都必須經過解離為二價鐵離子之后才能與腸腔中的轉鐵蛋白結合，再經腸黏膜上的受體吸收，進入腸黏膜細胞，吸收率僅1%左右［7］。人體通過吸收食物中血紅素的機制來吸收生血寧，無毒性反應，而且吸收率高。臨床試驗結果顯示無明顯副作用，尤其沒有一般鐵劑所具有的胃腸道反應。本試驗結果表明，生血寧無明顯圍產期毒性作用，即在圍產期給藥不會對仔鼠的生理發育、神經反射功能以及行為方式產生影響，也不會引起外觀和內臟的異常或畸形。作為一種服用安全、方便的純中藥制劑，生血寧為妊娠中、后期缺鐵性貧血患者提供了一種新的治療選擇。