【摘要】 研究辛夷揮發(fā)油納米滴鼻劑對大鼠鼻黏膜血管通透性的影響. ［方法］40只SD大鼠隨機(jī)分成正常組、麻黃堿組、辛夷揮發(fā)油組、辛夷納米滴鼻劑小劑量組、辛夷納米滴鼻劑大劑量組，按照鼻黏膜色素滲出法的操作，測定用藥后單位重量鼻黏膜組織浸泡液的吸光度（A）值，按回歸方程計(jì)算EB的含量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。［結(jié)果］與正常組相比，辛夷揮發(fā)油、辛夷揮發(fā)油納米滴鼻劑對大鼠鼻黏膜毛細(xì)血管通透性有抑制作用，大劑量的辛夷揮發(fā)油納米滴鼻劑與同濃度的辛夷揮發(fā)油滴鼻劑作用與麻黃堿作用相當(dāng)，小劑量的辛夷揮發(fā)油納米滴鼻劑作用則不及麻黃堿。［結(jié)論］辛夷揮發(fā)油納米滴鼻劑對鼻黏膜通透性有抑制作用。

【關(guān)鍵詞】 辛夷；揮發(fā)油；納米；鼻黏膜；通透性

Abstract: ［Objetive］ To study the effects of nasal nanonaristilla of Mangnolian Biondii volatile oil on mucosa permeability.［Method］ 40 rats were randomly pided into normal group， Ephedrine group， Mangnolian Biondii volatile oil group， Mangnolian Biondii volatile oil (low dose) group， nanonaristilla of Mangnolian Biondii volatile oil (large dose) group. Follow the procedure of stain exudation method to get the absorbance value(A value) of nasal mucosa. According to the regression equation of EB density to calculate the content of EB in the nasal mucosa and make statistical analysis.［Result］Compared to normal group， the other 4 groups showed depressant effect mucosa permeability. Compared to the Ephedrine group， the nanonaristilla Mangnolian Biondii volatile oil (large dose) and Mangnolian Biondii volatile oil had the similar effect on the mucosa permeability， the nanonaristilla of Mangnolian Biondii volatile oil (low dose) was inferior to the Ephedrine.［Conclusion］ The nanonaristilla of Mangnolian Biondii volatile oil has inhibitory action on mucosa permeability.

Key words: Mangnolian Biondii volatile oil；nanonaristilla；nasal mucosa，;permeability

本文對辛夷揮發(fā)油以及由辛夷揮發(fā)油制備所得的辛夷揮發(fā)油納米脂質(zhì)體滴鼻劑對于局部鼻黏膜通透性的作用進(jìn)行探討。

1 材料

1.1 動物

SD大鼠40只（雄性，6～8周齡，體重250～300g左右），清潔級實(shí)驗(yàn)動物，由新華醫(yī)院動物房（合格證號:SYXK滬2003～0031）提供，隨機(jī)分為5組，每組8只。實(shí)驗(yàn)前夜禁食，不禁水。

1.2 試劑與儀器

伊文思藍(lán)染料粉末，購于國藥集團(tuán)上海試劑公司，用生理鹽水配制成3％的溶液，4℃冰箱內(nèi)保存，備用。甲酰胺溶液（產(chǎn)品批號：T20070123），購于國藥集團(tuán)上海試劑公司，常溫保存，備用。722型分光光度計(jì)（編號 70402008084，上海精密儀器有限公司），恒溫水浴箱（DKS22，上海源長實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備廠）。

1.3 藥物

1%呋麻滴鼻液（10ml含有麻黃堿0.1g，上海運(yùn)佳黃浦制藥公司生產(chǎn)，產(chǎn)品批號：070402），由新華醫(yī)院西藥房提供；辛夷，購于上海華清中藥飲片公司，批號為2004102802，產(chǎn)地為河南，由上海中醫(yī)藥大學(xué)提取辛夷揮發(fā)油，得油率為1.8%，由同濟(jì)大學(xué)材料學(xué)院將辛夷揮發(fā)油制備納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體，并加工成辛夷納米滴鼻劑（濃度為5.01mg/ml，以辛夷揮發(fā)油量記）。經(jīng)權(quán)威檢測證明所制得的辛夷揮發(fā)油納米脂質(zhì)體滴鼻劑尺度在56.2～73.4nm，包封率在80.7%～85.9%，在常溫、避光條件下貯存穩(wěn)定性良好，理化性質(zhì)穩(wěn)定。辛夷揮發(fā)油滴鼻劑，將50mg辛夷揮發(fā)油加生理鹽水至10ml震蕩搖勻（濃度與辛夷揮發(fā)油納米滴鼻劑相同）。

2 方法

2.1 分組

大鼠40只隨機(jī)分成正常組、麻黃堿組、辛夷揮發(fā)油組、辛夷納米滴鼻劑小劑量組、辛夷納米滴鼻劑大劑量組，每組8只，藥后同一時間點(diǎn)采集樣品。實(shí)驗(yàn)前夜禁食，不禁水。

2.2 給藥及操作

正常組予生理鹽水滴鼻，麻黃堿組予呋麻滴鼻液（0.57mg/kg）滴鼻，辛夷揮發(fā)油組予0.5%辛夷揮發(fā)油滴鼻液（2mg/kg）滴鼻，辛夷納米滴鼻劑小劑量組予辛夷納米脂質(zhì)體（1mg/kg）滴鼻，辛夷納米滴鼻劑大劑量組予辛夷納米脂質(zhì)體（2mg/kg）。正常組予生理鹽水100μl，每側(cè)50μl。其他組均以微量進(jìn)樣器抽取相應(yīng)藥液，加生理鹽水至100μl后混勻，每側(cè)鼻孔50μl滴鼻。用2%戊巴比妥腹腔注射麻醉后（30mg/kg），置于平板上仰臥固定。剪開腹股溝處皮膚，剝離附近筋膜，充分暴露股靜脈。從股靜脈注射3%EB(30mg/kg)溶液，之后，各組分別迅速向大鼠鼻腔內(nèi)滴入藥物或生理鹽水。于注射伊文思藍(lán)10min后打開大鼠胸腔，暴露心臟及周圍組織，以生理鹽水經(jīng)主動脈灌注，將血管中的伊文思藍(lán)沖洗干凈。打開鼻腔，取下鼻中隔黏膜及兩鼻腔內(nèi)整個鼻甲。

2.3 伊文思藍(lán)含量測定

將取出的組織用生理鹽水輕輕沖洗，用濾紙吸干，于電子天平上精密稱重，取組織100mg，置于含3ml甲酰胺的小瓶，37℃孵育24h，使藍(lán)染的標(biāo)本褪色。取藍(lán)染液1ml放置于比色皿中，置分光光度計(jì)620nm處比色，記錄單位重量鼻黏膜所含伊文思藍(lán)的吸光度值（A值），再根據(jù)分別稀釋成不同濃度(0.5、1.0、2.0、4.0、5.0×10-3mg/ml)，測定620nm測定其A值，以濃度(C)為橫坐標(biāo)，以A為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，所得的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程C=3.8711A +0.1277(r=0.993)［1］計(jì)算EB濃度，再計(jì)算單位重量鼻粘膜組織中EB含量，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用單因素方差分析法，數(shù)據(jù)均采用x±s表示，采用SPSS 13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

3 結(jié)果

3.1 各組吸光度A值 見表1。表1 各組吸光度A值(略)

3.２ 單位重量鼻粘膜組織中所含EB量 見表2。表2 單位重量鼻黏膜組織中所含EB量比較(略)

與正常組比較，*P<0.05，與麻黃組比較，▲ P>0.05，與辛夷揮發(fā)油組比較，●P>0.05，與麻黃組比較，■P<0.05 4 討論

鼻黏膜具有豐富的毛細(xì)血管，能對外界環(huán)境的變化，致炎物質(zhì)放血管活性物質(zhì)等產(chǎn)生靈敏的收縮或擴(kuò)張反應(yīng)。在以變應(yīng)性鼻炎為代表鼻黏膜炎癥過程中，炎癥介質(zhì)作用于鼻黏膜，使血管擴(kuò)張則致使局部通透性增高，臨床常表現(xiàn)為長時間的鼻塞感，嚴(yán)重影響患者的正常生活質(zhì)量［2］。辛夷性溫味辛，歸肺、胃經(jīng)，具有散風(fēng)寒，通鼻竅之功，現(xiàn)代中醫(yī)認(rèn)為辛夷芳香質(zhì)輕，性浮而散，善散頭面風(fēng)邪而通鼻竅，許多治療鼻部炎癥的驗(yàn)方中都含有辛夷。有記載稱：辛夷揮發(fā)油有收縮鼻黏膜血管作用：可代替麻黃素，有通鼻消炎之效［3］。本次實(shí)驗(yàn)研究證明，辛夷揮發(fā)油納米滴鼻劑可以收縮鼻黏膜局部的毛細(xì)血管，在觀察期內(nèi)與麻黃堿作用相當(dāng)，同等濃度的辛夷揮發(fā)油也有類似的效應(yīng)。

麻黃素是一種短效的主要作用是使鼻粘膜血管收縮，解除黏膜腫脹，改善鼻腔及鼻竇的通氣引流，適用于治療鼻炎以及鼻竇炎引起的鼻阻塞。但是只能暫時性地收縮鼻腔血管減輕鼻塞，頻繁使用可產(chǎn)生快速耐受現(xiàn)象，出現(xiàn)更為嚴(yán)重的鼻塞，長期使用可造成鼻黏膜損傷，產(chǎn)生耐藥性和藥物依賴性［4］。因此對于麻黃素類的減充血劑在臨床上應(yīng)謹(jǐn)慎運(yùn)用。

辛夷納米滴鼻劑是結(jié)合現(xiàn)代納米技術(shù)對傳統(tǒng)辛夷揮發(fā)油進(jìn)行改進(jìn)而得到的局部鼻黏膜制劑，改變了傳統(tǒng)辛夷揮發(fā)油，易揮發(fā)、刺激性大的缺陷。在前期對辛夷納米滴鼻劑進(jìn)行了初步的藥效學(xué)、纖毛毒性及黏膜毒性的研究［3］，顯示經(jīng)14天的連續(xù)滴鼻，大鼠鼻黏膜超微結(jié)構(gòu)無明顯改變；對蛙上腭黏膜纖毛活性的也無明顯的抑制作用。因此，辛夷揮發(fā)油納米滴鼻劑可以作為臨床上改善鼻黏膜血管通透性的藥物進(jìn)行運(yùn)用。