作者：吳曉青 童妍 王興 閆志勇

【摘要】 探索新的何首烏物質基礎研究方法。通過分析現行的何首烏物質基礎研究方法的局限性，結合筆者近年來在中藥物質基礎研究和中藥血清藥物化學研究中的體會，提出了用血清藥物化學的研究方法進行何首烏物質基礎研究并在研究中引入高效液相色譜二極管陳列檢測器-質譜聯用（HPLC-DAD-MS）指紋圖譜技術的設想。

【關鍵詞】 何首烏； 血清藥物化學； 高效液相色譜二極管陳列檢測器-質譜聯用

何首烏為蓼科植物何首烏Polygonum multiflorum Thunb.的干燥塊根，是著名的生熟異治的中藥，有生首烏和制首烏之分。生品性平，味甘、苦，歸心、肝、大腸經；制品性變溫、味轉甘，歸肝、腎經。生首烏截瘧解毒，潤腸通便；制首烏功善補益精血，固腎烏須［1］。目前，對何首烏的化學成分及藥效研究較多，但有關的成分研究大多只限于成分的定性、定量的分析［2］，針對藥效物質基礎的研究極少。而藥效物質基礎研究是中藥現代化的核心問題［3］，只有在中藥物質基礎研究成果的基礎上，才能有效地進行相關中藥復方產品的二次開發、中藥有效部位以及中藥有效單體成分的三個層次的研究開發工作，提高產品的技術壁壘。藥效物質基礎的關鍵，不僅是在體外研究藥物的化學成分，其根本在于要明確藥物以何種形式進入體內、進入體內后如何變化，只有這樣我們才能把握中藥的內在實質［4］，因此采用血清藥物化學的研究方法對何首烏的血中移行成分進行詳細分析，闡明何首烏在體內以何種成分、何種形式發揮作用具有重要意義。 血清藥物化學是從含有真正有效成分的血液中分取血清進行藥物學研究，由日本學者田代真一于1988年提出，中藥血清藥物化學是以傳統藥物化學方法為基礎，綜合應用多種現代技術，分析鑒定進入體內后血清中移行成分，研究其與藥效相關性，確定中藥藥效物質基礎的應用學科。王喜軍等［5，6］應用本方法已經成功的完成了茵陳蒿湯的生物藥效學研究，同時也對六味地黃丸血清藥物化學進行了研究。 中藥血清藥物化學研究對發展中藥藥代動力學，建立與國際接軌的中藥及復方質量標準，闡明中藥及復方的配伍機制，促進新藥的開發將起到關鍵性的作用。 本課題將高效液相色譜一二極管陣列檢測器-質譜聯用（HPLC-DAD-MS）指紋圖譜技術用于何首烏活性成分的血清藥物化學研究。HPLC-DAD-MS聯用技術將液相色譜高效的在線分離能力與質譜的高選擇性，高靈敏度的檢測能力相結合，可以同時得到化合物的保留時間、在線紫外光譜、分子量及特征結構碎片等豐富的信息，是復雜體系分離最有力的研究手段［7］。質譜檢測器（MSD）在選擇合適的電離方法的前提下，大多數化合物都能被電離得到檢測，因而可以獲得更多的化合物的結構信息，DAD檢測器聯用可快速鑒定提取物中的已知成分，非常適合中藥復雜體系的分析，有針對性地檢測中藥中不同類型的化學成分［8］，國內外許多優秀的專家學者在這個研究領域作了大量的工作 ［9，10］，積累了豐富的經驗，這就為中藥血清藥物化學的研究提供了新思路和新方法。 近年來有學者致力于將HPLC-DAD-MS技術應用到中藥指紋圖譜的研究［11~14］。在傳統的色譜指紋圖譜的研究工作中，為了盡可能地闡明中藥的物質基礎，需要分離多個活性成分或指標成分作為標準品，工作量巨大。將HPLC-DAD-MS技術應用于中藥的物質基礎研究，由于前述的DAD檢測器和MSD檢測器的獨特優勢，使得中藥物質基礎的研究有了質的飛越，不再需要對樣品進行復雜的前處理。我們采用血清藥物化學的方法研究何首烏活性成分，并在研究中將HPLC-DAD-MS指紋圖譜技術用于何首烏血中移行成分的研究，為何首烏的血清藥物化學研究，進而為何首烏活性成分的研究，提供了新的思路。 此外，我們已經進行過初步預試，所得結果表明，用HPLC-DAD-MS指紋圖譜技術用于何首烏活性成分的血清藥物化學研究具有可行性，由于排除了何首烏粗提物本身理化性質的干擾，避免了直接體外實驗得出的錯誤結論，將能發現何首烏中真正的活性部位和有效成分，為進一步進行活性成分的藥代動力學研究及以何首烏為原料的新藥的開發打下堅實的基礎。