【摘要】 目的探討不同產(chǎn)地蟲草提取物的藥效作用。方法采用二甲苯致小鼠耳腫脹的方法，測定耳片重量；采用比色分析測定小鼠游泳后肝糖元及血清乳酸含量以及測定小鼠注射剛果紅后血中剛果紅的殘余量。結(jié)果在抗炎及抗疲勞作用方面青海蟲草效果最佳，提高吞噬功能方面與西藏蟲草效應(yīng)相當(dāng)。結(jié)論青海蟲草在部分藥效學(xué)方面具有一定的優(yōu)勢。

【關(guān)鍵詞】 蟲草提取物； 抗炎； 抗疲勞

研究表明，蟲草具有抗炎、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)等多種作用。本文對不同產(chǎn)地的蟲草提取物的藥效學(xué)作一比較研究，為道地藥材的質(zhì)量評價提供實驗依據(jù)。現(xiàn)報道如下。

1 材料

1.1 藥物 青海蟲草和西藏蟲草，采自青海省囊謙縣、瑪沁縣和西藏那曲地區(qū)，四川蟲草委托四川省藥品檢驗所提供樣品，經(jīng)中國藥品生物制品檢定所中藥室鑒定為麥角菌科真菌冬蟲夏草菌寄生在蝙蝠娥科昆蟲幼蟲上的子座及幼蟲尸體的復(fù)合體。蟲草提取物為甲醇提取物，三種蟲草提取物回收率分別為19.6%，23.3%和16.1%。灌胃劑量按回收率計算，將蟲草提取物加入適量生理鹽水中，大、小劑量分別相當(dāng)于生藥4 g/kg和2 g/kg，超聲混懸。小鼠給藥量為0.1 ml/10 g體重。剛果紅，肝糖元及乳酸試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.2 動物 昆明種小鼠（18～22）g，雌雄各半，購于中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院試驗動物研究所。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 實驗數(shù)據(jù)以±s表示，應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計軟件進行方差分析。

2 方法與結(jié)果

2.1 蟲草提取物對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響［1，2］ 小鼠隨機分為7組，每組10只。按表1的蟲草種類及劑量灌胃。末次灌胃給藥1 h后在每只小鼠右耳均勻涂二甲苯0.05 ml致炎。30 min后，小鼠脫頸椎處死，剪下耳殼，用直徑8 mm打孔器取雙側(cè)對稱處的耳片稱重，以其重量差為腫脹指標(biāo)，對照組灌以同等劑量的生理鹽水。結(jié)果見表1。

表1 蟲草提取物對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響（略）

與對照組比較，*P<0.05，**P<0.01；n=10 從表1可見，不同產(chǎn)地的蟲草提取物均能抑制二甲苯致小鼠耳腫脹。青海和西藏蟲草大劑量組表現(xiàn)出明顯的炎癥抑制作用，與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異。四川蟲草炎癥抑制作用較弱，與對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異。

2.2 蟲草提取物對小鼠抗疲勞實驗的影響［1，2］小鼠隨機分為7組，每組10只。同“2.1”項方法灌胃給藥，1次/d，連續(xù)14 d，對照組灌以同等劑量的生理鹽水。末次給藥24 h后，小鼠置游泳箱中(水深15 cm，水溫37℃)游泳，45 min后分別摘眼球取血，按試劑盒說明操作，檢測全血乳酸含量及肝糖元含量。結(jié)果見表2。 從表2可見，在本實驗中，與對照組比較，青海蟲草藥效最強，大、小劑量下均可使小鼠乳酸含量明顯降低；西藏蟲草大、小劑量也能明顯降低全血乳酸含量；四川蟲草在大劑量時亦表現(xiàn)出良好的降低乳酸的作用。四川蟲草和青海蟲草能明顯提高運動后的肝糖原含量，西藏蟲草在大劑量條件下也表現(xiàn)出類似作用，但強度稍弱。

表2 蟲草提取物對小鼠體內(nèi)乳酸及肝糖原含量的影響（略）

與對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；n=10

2.3 蟲草提取物對小鼠剛果紅吞噬功能的影響［3］小鼠隨機分為7組，每組10只，按“2.1”項方法灌胃給藥，1次/d，連續(xù)7 d。對照組灌以同等劑量的生理鹽水。末次給藥30 min后分別用經(jīng)肝素處理過的毛細管從眼眶后靜脈叢取血50 μl，立即放入5.0 ml蒸餾水中，使之完全溶血，作為對照管；之后從尾靜脈定量注射10 mg/ml剛果紅生理鹽水溶液0.1 ml/10 g體重，于注射后30 s摘眼球取血50 μl，立即放入5.0 ml蒸餾水中，使之完全溶血，作為測定管，在510 nm波長下，以蒸餾水調(diào)零，檢測對照管和測定管光密度，根據(jù)兩者差值，從剛果紅標(biāo)準(zhǔn)曲線中查出樣品血中剛果紅殘余量。 剛果紅標(biāo)準(zhǔn)曲線：標(biāo)準(zhǔn)濃度為5，10，15，20，25 μg/ml，以蒸餾水調(diào)零，檢測510 nm處光密度，并將結(jié)果進行直線回歸，得回歸直線方程：Y=-0.614 5+29.676 3X，X為光密度值，Y為濃度值，r=0.995 1。結(jié)果見表3。

表3 蟲草提取物對小鼠剛果紅吞噬功能的影響（略）

與對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；n=10 從表3可見，四川蟲草效果稍差，只在大劑量下表現(xiàn)出明顯促進剛果紅吞噬的作用；西藏和青海蟲草藥效較好，其中西藏蟲草的作用更好。

3 小結(jié) 本文通過研究不同產(chǎn)地蟲草提取物的藥效學(xué)作用，擬比較本省與外省(西藏、四川)蟲草在抗炎及抗疲勞、提高吞噬功能方面的影響，以確定本省蟲草是否具有藥效學(xué)方面的優(yōu)勢。 實驗結(jié)果表明，在抗炎及抗疲勞方面，青海蟲草表現(xiàn)出明顯的炎癥抑制作用；提高吞噬功能作用較好。西藏蟲草與青海蟲草相當(dāng)，也有明顯的抗炎作用，四川蟲草的總體藥效相對較差。實驗結(jié)果和分析表明，青海蟲草在部分藥效方面具有一定的優(yōu)勢，其作用機制尚需進一步實驗研究。

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