【摘要】 目的從藥效學(xué)角度探討半夏瀉心湯君藥為何。方法采用均勻設(shè)計(jì)法對半夏瀉心湯進(jìn)行拆方，測定各配比組方對胃酸含量、胃蛋白酶活性及胃黏液分泌的影響，針對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用MATLAB軟件，建立藥味與藥效指標(biāo)（胃酸、胃蛋白酶、胃黏液）的非線性影射模型，并應(yīng)用該模型，分析半夏瀉心湯中各藥味在全方背景下的量-效關(guān)系。結(jié)果半夏對正常大鼠胃蛋白酶活性具有抑制作用，隨劑量的增加抑制作用增強(qiáng)；對大鼠胃酸分泌具有抑制作用，劑量小于21 g時(shí)隨劑量增加抑制作用增強(qiáng)。結(jié)論 半夏對胃分泌的影響的藥效學(xué)作用與半夏瀉心湯相似，提示半夏為半夏瀉心湯之君藥。

【關(guān)鍵詞】 半夏瀉心湯； 君藥； BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)； 數(shù)學(xué)建模 半夏瀉心湯出自張仲景之《傷寒雜病論》， 主治寒熱錯(cuò)雜之痞證。該方由半夏、干姜、黃連、黃芩、人參、大棗、甘草組成，方中君、臣、佐、使齊備， 是《傷寒論》中少有君臣佐使齊備的大組方，其配伍規(guī)律在經(jīng)方中極具代表性。 近年來， 有關(guān)半夏瀉心湯的研究不斷取得進(jìn)展， 但對于“半夏瀉心湯的君藥為何”這一問題，歷代醫(yī)家眾說紛紜，各家對半夏瀉心湯君藥的認(rèn)識并不統(tǒng)一，存在諸多爭議。那么，半夏瀉心湯究竟何者為君呢？本文將從藥效學(xué)角度對此問題作一探討。

1 材料

1.1 藥品與試劑生姜、半夏、炙甘草、黃芩、黨參、干姜、黃連、大棗（半夏瀉心湯各藥味+生姜）均購自同仁堂，并經(jīng)生藥專家鑒定。拆方配比方案按均勻設(shè)計(jì)表進(jìn)行。取干浸膏若干，研碎，加水適量，煮沸，調(diào)整生藥濃度1g/ml，4°C貯存。阿利辛蘭，BioRad 分裝；福林-酚試劑、牛血紅蛋白粉購于Sigma公司；其余試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 動物SD大鼠，200～250 g，雌雄各半，隨機(jī)分為24組，每組15只。其中實(shí)驗(yàn)組20組，正常對照1組。另設(shè)3經(jīng)方組（半夏瀉心湯、生姜瀉心湯、甘草瀉心湯）。

1.3 儀器724微機(jī)型可見分光光度計(jì)，上海光學(xué)儀器廠。

2 方法

2.1 各組方的配比以各藥味作為考察因子，以各藥味的用量作為考察水平，取20水平。按均勻設(shè)計(jì)表得到20個(gè)配比組合（1～20組）。第21組為空白對照組，第22，23，24組分別為半夏瀉心湯組、甘草瀉心湯組及生姜瀉心湯組。組方配比見表1。

2.2 藥理實(shí)驗(yàn)

2.2.1 胃液的采集 實(shí)驗(yàn)組大鼠按人用量的7倍給藥，2次/d，連續(xù)5 d，對照組每日蒸餾水灌胃。大鼠禁食24 h，自由飲水，乙醚麻醉下開腹，將幽門結(jié)扎，十二指腸給藥一次，禁食禁水，自由活動4 h。將胃液收集在離心管中， 3 500 r/min離心10 min后，吸取上清待用。

2.2.2 胃酸的測定 取胃液0.1 ml，稀釋至1 ml，以1%的酚酞作為指示劑。用0.01 mol/L的氫氧化鈉溶液滴定，直至出現(xiàn)紅色為止。以所耗的氫氧化鈉量計(jì)量總酸度。結(jié)果見表2。

2.2.3 胃蛋白酶活性測定 采用改良安宋（Anson）氏法。640 nm比色，蒸餾水調(diào)零，讀取OD值。查L-酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線，按下列公式計(jì)算胃蛋白酶活性。胃蛋白酶活性（μg酪氨酸/ml胃液/min）=（測定管標(biāo)準(zhǔn)曲線讀數(shù)-對照管標(biāo)準(zhǔn)曲線讀數(shù)）×75。 結(jié)果見表2。

表1 拆方各組藥味劑量配比組成表（略）

2.2.4 胃液黏液結(jié)合量的測定 取胃液1 ml，加1%阿利辛蘭0.1 ml，pH 5.8的檸檬酸磷酸緩沖液3.3 ml，再加蒸餾水至5.0 ml，混勻。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管一只，內(nèi)加阿利辛蘭0.1 ml，pH 5.8的檸檬酸磷酸緩沖液3.3 ml，用蒸餾水稀釋至5.0 ml。將樣品及標(biāo)準(zhǔn)管于20℃室溫靜置24 h后， 2 500 r/min離心10 min，取上清液，在615 nm比色。所得OD值與加入胃液中阿利辛蘭OD值的差值，即胃液黏液的結(jié)合量，計(jì)算方法如下： 1 mg－測量值/標(biāo)準(zhǔn)值×1mg=mg阿利辛蘭。結(jié)果見表2。

2.2.5 數(shù)據(jù)處理各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的組間比較采用方差分析的方法。并對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用MATLAB6.5軟件，建立基于BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)數(shù)學(xué)模型，創(chuàng)建半夏瀉心湯的藥味藥量與藥效指標(biāo)（胃酸、胃蛋白酶、胃黏液）的非線性影射模型。

2.2.6 模型建立選取組成半夏瀉心湯的7味藥物及生姜（半夏、生姜、黃芩、黃連、黨參、甘草、大棗、干姜）作為輸入層神經(jīng)元，以表示3個(gè)復(fù)方的配伍要素。選取胃酸、胃蛋白酶、胃黏液藥效學(xué)指標(biāo)作為輸出神經(jīng)元，以表示不同配比的影響結(jié)果。中間層選擇1層神經(jīng)元。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)在輸入前應(yīng)用規(guī)格化函數(shù)進(jìn)行處理，使所有輸入、輸出樣本規(guī)范到［-1，1］的范圍內(nèi)。隱層單元數(shù)的確定采用了“試錯(cuò)法”［1］進(jìn)行確定。設(shè)置最大的循環(huán)迭代為5 000；設(shè)定收斂誤差為0.001。BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)算法采用動量法和學(xué)習(xí)速率自適應(yīng)調(diào)整兩種策略相結(jié)合。 將所得的藥理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及半夏瀉心湯不同的配比輸入，通過4 000余次的訓(xùn)練，網(wǎng)絡(luò)收斂致目標(biāo)誤差為0.001，從而建立起拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)為8-10-3的藥味藥量與藥效學(xué)指標(biāo)的非線性影射模型。

表2 藥物不同配比對正常大鼠胃分泌的影響（略）

2.2.7 模型評價(jià)通過測定組與擬合組數(shù)據(jù)組間差均方誤差函數(shù)、擬合圖等看出，模型對學(xué)習(xí)過和未學(xué)過樣本具有很好的擬合與預(yù)測能力，學(xué)習(xí)過的樣本誤差＜10%，未學(xué)習(xí)過的樣本誤差＜20%。胃分泌模型均方誤差為14.69。反映藥味、藥量與胃分泌關(guān)系模型網(wǎng)絡(luò)預(yù)測性能良好。藥味藥量與藥效學(xué)指標(biāo)的網(wǎng)絡(luò)模型建立。

2.2.8 模型應(yīng)用通過應(yīng)用藥味與藥效學(xué)指標(biāo)的非線性影射模型，可以得出各藥味在全方背景下的量效關(guān)系。結(jié)果顯示：半夏對正常大鼠胃蛋白酶活性具有抑制作用，隨劑量的增加抑制作用增強(qiáng)；對大鼠胃酸分泌具有抑制作用，劑量小于21 g時(shí)隨劑量增加抑制作用增強(qiáng)，大于21 g時(shí)抑制作用減弱，甚至?xí)霈F(xiàn)促進(jìn)胃酸分泌的作用。而其他各藥味中干姜對正常大鼠胃蛋白酶活性具有抑制作用，但對大鼠胃酸分泌、胃黏液分泌具有輕微的促進(jìn)作用；黨參對正常大鼠胃蛋白酶活性具有抑制作用；黃芩、黃連、大棗、甘草、生姜多對胃蛋白酶、胃酸分泌有促進(jìn)作用，而對胃黏液分泌有抑制作用。本文僅給出半夏在半夏瀉心湯全方背景下的藥量與藥效（胃酸、胃蛋白酶、胃黏液）關(guān)系圖。如圖1。

圖1 半夏劑量變化與胃酸、胃蛋白酶、胃黏液的關(guān)系（略）

4 討論 關(guān)于半夏瀉心湯何者為君的問題眾說紛紜，概括起來講主要有以下幾種說法，如認(rèn)為半夏為君，該觀點(diǎn)占主要地位，還有學(xué)者認(rèn)為黃連為君，認(rèn)為半夏、黃連為君，認(rèn)為黃連、干姜為君，認(rèn)為半夏、黃連、干姜共同為君。盡管學(xué)者對半夏瀉心湯君藥的認(rèn)識眾說紛紜，但其主流思想仍為半夏。如清·錢湟［2］提出以藥物性味功效為依據(jù)，確立半夏瀉心湯中的君藥為半夏。清·柯琴［3］、清·羅美［4］、閻德潤［5］等提出以癥狀為依據(jù)，確立半夏瀉心湯中的君藥為半夏。清·秦之禎［6］提出以痰飲病機(jī)為依據(jù)，確立半夏瀉心湯中的君藥為半夏。還有當(dāng)代著名醫(yī)家劉渡舟［7］教授也贊同半夏為君的說法。 眾多醫(yī)家多從中醫(yī)理論就半夏瀉心湯君藥為半夏給予了闡釋，但缺乏客觀的藥效學(xué)依據(jù)。為解決該問題，本文從藥效學(xué)的角度，通過實(shí)驗(yàn)研究探討半夏瀉心湯君藥的具體內(nèi)涵。本研究通過對半夏瀉心湯進(jìn)行拆方，得出半夏等8味藥在半夏瀉心湯全方背景下的量效關(guān)系。研究結(jié)果顯示：半夏對正常大鼠胃蛋白酶活性具有抑制作用，隨劑量的增加抑制作用增強(qiáng)；雖然黨參干姜對胃分泌也具有抑制作用，但結(jié)合本課題的其他研究（半夏瀉心湯對胃腸運(yùn)動的影響的實(shí)驗(yàn)研究顯示半夏對胃腸運(yùn)動具有雙向調(diào)節(jié)作用），以及以往對半夏瀉心湯全方藥效學(xué)的研究［8，9］，認(rèn)為半夏與半夏瀉心湯對小鼠胃分泌的影響方面具有一定的一致性，即半夏的藥效學(xué)作用與半夏瀉心湯所主病癥具有相似性，提示半夏可能為半夏瀉心湯之君藥。 中醫(yī)認(rèn)為心下痞是由寒熱錯(cuò)雜之邪痞塞于中焦，脾胃升降失和所致，故當(dāng)兼見惡心、嘔吐等胃氣不降之證，以及腸鳴、下利等脾氣不升之證?！督饏T要略·嘔吐·下利病脈證治》謂：“嘔而腸鳴，心下痞者，半夏瀉心湯主之”。本研究顯示半夏可以通過減少胃酸分泌，減少胃蛋白酶活性，從而減輕胃黏膜損傷，起到治療消化系統(tǒng)疾病的作用。這與以往對半夏瀉心湯的藥理實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果一致，同時(shí)也與中醫(yī)所述半夏瀉心湯所主病證相符。提示半夏可能為半夏瀉心湯的君藥。 另外，以往醫(yī)學(xué)預(yù)測模型的建立多選用回歸方法進(jìn)行建模，本試驗(yàn)也嘗試試用了該方法建模，但模型效果比較顯示，對于該問題，多元回歸分析模型的擬合及預(yù)測能力遠(yuǎn)不如神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型［10］。如果考慮到復(fù)方配伍中存在非線性的問題，而應(yīng)用非線性回歸模型時(shí)，又會遇到模型選擇困難的問題，即目前對于中醫(yī)復(fù)方配伍的非線性關(guān)系，尚無成功的、可引用的模型可以借鑒，難以選擇應(yīng)用何種模型建模。而BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)通過對數(shù)據(jù)的學(xué)習(xí)建立模型，不需要現(xiàn)成的數(shù)學(xué)模型建模，適合應(yīng)用于中醫(yī)復(fù)方的非線性配伍的研究中［11］。該研究結(jié)果也顯示了BP神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)對學(xué)習(xí)過的樣本有非常優(yōu)秀的擬合能力，而對未學(xué)過的樣本也有較好的預(yù)測能力。 該研究提示半夏瀉心湯君藥為半夏，其藥效學(xué)依據(jù)為：半夏可以通過減少胃酸分泌及減少胃蛋白酶活性，減少對胃黏膜的損傷，從而起到治療消化系統(tǒng)疾病的作用。該研究為半夏瀉心湯君藥為半夏的觀點(diǎn)提供了客觀的藥效學(xué)依據(jù)。

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