【摘要】 目的 探討川芎藥材的鑒別方法，完善川芎藥材的質量標準。方法 用薄層色譜法鑒別川芎藥材；以高效液相色譜法測定阿魏酸的含量。選用Agilent Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)，流動相為甲醇-1%冰醋酸溶液(21∶79)，流速為1.0 mL/min，檢測波長為320 nm。結果 薄層色譜中斑點清晰，易于識別。高效液相色譜法精密度、重現性良好；阿魏酸在0.042 5～0.382 5 μg范圍內有較好的線性關系，平均回收率為97.10%(RSD＝1.31%)。結論 本法可有效控制川芎藥材的質量。

【關鍵詞】 川芎；薄層色譜法；高效液相色譜法；質量標準

Abstract：Objective To improve the quality standard for Chuanxiong by studing the method of discriminating Chuanxiong. Methods Chuanxiong was identified by TLC. The content of ferulic acid in Chuanxiong was determine by HPLC. The Agilent Eclipse XDB-C18 (4.6 mm×150 mm， 5 μm) was used， mobile phase was methanol-1% acetic acid solution (21∶79)， flow rate was 1.0 mL/min， detection wavelength was 320 nm. Results The TLC spots developed were fairly and simply identical. HPLC was accurate and reproducible. Ferulic acid showed a good liner relationship at range of 0.042 5～0.382 5 μg， the average recovery was 97.10% (RSD＝1.31%). Conclusion These methods can be used to control the quality of Chuanxiong effectively. Key words：Chuanxiong；TLC；HPLC；quality standard 川芎為常用中藥，用于治療月經不調、經閉痛經、胸脅刺痛、風濕痹痛等。《中華人民共和國藥典》先后采用性狀、顯微、薄層色譜鑒別來控制川芎藥材的質量。為了使川芎藥材質量控制標準更科學、嚴謹和更適應現代檢驗技術，筆者對原標準試作了一些相應改進，完善川芎藥材的薄層色譜鑒別方法，同時采用高效液相色譜法測定川芎中阿魏酸的含量，方法簡便、準確、重現性好，從而完善和提高了川芎藥材的質量標準。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent1100系列高效液相色譜儀，CQX25-06超聲波清洗器(上海必能信超聲有限公司)。

1.2 試藥 川芎藥材由廣西玉林制藥有限責任公司提供，收集自四川、湖南、廣西地區，經廣西中醫學院林安平教授鑒定為Ligusticum chuanxiong Hort.；阿魏酸對照品(供含量測定用，批號0773-9910)、阿魏酸對照品(供鑒別用，批號0773-9001)、川芎對照藥材(批號060102)均由中國藥品生物制品檢定所提供。甲醇為色譜純，其余試劑均為分析純。

2 薄層色譜鑒別 取本品粉末1 g，加乙醚20 mL，超聲提取20 min，濾過，揮干，殘渣加乙醇1 mL使溶解，作為供試品溶液[1]。另取川芎對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法[2005年版《中華人民共和國藥典》(一部)附錄ⅥB]試驗，吸取上述2種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(7∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上顯相同的藍色熒光斑點。

3 阿魏酸的含量測定

3.1 色譜條件[2] Agilent Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)；流動相：甲醇-1%冰醋酸溶液(21∶79)；流速：1.0 mL/min；檢測波長：320 nm；柱溫：30 ℃；進樣量：10 μL。理論塔板數按阿魏酸計算應不低于3 500。

3.2 對照品溶液的制備 精密稱取阿魏酸對照品適量，加甲醇溶解制成每1 mL含0.042 5 mg的對照品貯備液。再精密吸取該貯備液3.0 mL，置于5 mL棕色容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

3.3 供試品溶液的制備 取本品適量，研細，稱取約0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入70%甲醇25 mL，密塞，精密稱定，加熱回流30 min，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液，用微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。

3.4 對照試驗 按照上述色譜條件，吸取對照品溶液、供試品溶液各10 μL，分別注入色譜儀，進行測定。結果供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，有相同保留時間的色譜峰(見圖1)。因此，可在此系統條件下對阿魏酸進行定量分析。

3.5 線性關系考察 精密吸取阿魏酸對照品貯備液(0.042 5 mg/mL)1.0、3.0、5.0、7.0、9.0 mL，分別置于10 mL棕色量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，制成一組濃度梯度溶液，搖勻，分別精密吸取10 μL，注入液相色譜儀，記錄峰面積。以對照品進樣量(μg)為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程為：Y＝－16.4X＋4 916.6，r＝0.999 5，表明阿魏酸在0.042 5～0.382 5 μg范圍內呈良好的線性關系。

3.6 精密度試驗 精密吸取同一對照品溶液，按上述色譜條件進行分析，重復進樣6次，結果峰面積均值為1 243.6，RSD＝0.74%。

3.7 重復性試驗 平行制備川芎藥材(批號060102)的供試品溶液6份，照“3.1”項下方法進行測定，結果平均含量為0.65 mg/g，RSD＝1.01%。

3.8 穩定性考察 精密吸取供試品溶液10 μL，分別在0、2、4、6 h各進樣1次，測定峰面積，RSD＝1.08%。表明供試品溶液在6 h內穩定。

3.9 加樣回收率試驗 稱取已知含量為0.63 mg/g的川芎藥材0.3 g，精密稱定，分別精密加入阿魏酸對照品貯備液(0.106 3 mg/mL)1.2、1.2、1.8、1.8、2.3、2.3 mL，照“3.3”項下方法制備供試品溶液，依法測定，計算回收率，結果見表1。表1 阿魏酸加樣回收率測定結果（略）

3.10 樣品測定

按“3.2”和“3.3”項下方法分別制備對照品溶液和供試品溶液，按上述色譜條件，精密吸取10 μL，注入色譜儀，測定，按外標一點法計算，結果見表2。表2 樣品測定結果（略）

4 討論 本實驗對川芎藥材進行了薄層色譜鑒別，結果與對照藥材、對照品斑點一致，且無雜質干擾斑點，效果較好。在川芎對照藥材薄層鑒別中，曾比較《中華人民共和國藥典》中的提取方法與乙醚直接超聲處理，結果斑點差別不大，所以選擇了操作簡單的直接超聲處理。在阿魏酸對照品薄層鑒別中，比較了甲醇超聲和稀鹽酸超聲后用乙醚萃取，結果直接用甲醇超聲提取的供試品有斑點干擾。在展開和顯色時，曾用《中華人民共和國藥典》[1]的展開和顯色條件，但考慮到二氯甲烷有毒，顯色劑[1%三氯化鐵乙醇溶液-1%鐵氰化鉀溶液(1∶1)的混合溶液]配制繁瑣，而且斑點易發散，后經反復嘗試，用環己烷-乙酸乙酯-冰醋酸(3∶1.5∶0.2)展開，噴10%磷鉬酸乙醇液后置氨蒸汽中熏，阿魏酸斑點特征明顯，效果好。 在含量測定中，供試品提取曾比較用甲醇直接超聲處理、70%甲醇直接超聲處理[1]、酸水提乙醚萃取[3]以及5%Na2CO3先使阿魏酸成鈉鹽，然后用乙醚脫脂，用鹽酸酸化使酸游離，再用乙醚萃取[4]，結果后兩種方法的雜質峰少，但含量較低；用甲醇直接超處時峰形不對稱，所以采用簡單而且易操作的70%甲醇直接超聲處理。在流動相選擇時，曾采用當歸原藥材[1]含量測定項下的乙腈-0.085%磷酸溶液，結果雜質峰多，峰形寬、不對稱。