作者：蘇芳，黃力，劉海英，王偉寧，王芳

【摘要】 目的 利用薄層色譜法和高效液相色譜法鑒別哮喘藥中是否添加了茶堿、鹽酸麻黃堿、醋酸地塞米松、醋酸潑尼松。方法 采用薄層色譜法、高效液相色譜法鑒別。結果 供試品中未檢出以上4種非法添加物。結論 薄層色譜鑒別方法簡便可靠，高效液相色譜法更靈敏精確，兩種鑒別方法都可為打擊在哮喘類中藥中擅自添加茶堿、鹽酸麻黃堿、醋酸地塞米松、醋酸潑尼松成分的違法行為提供有力依據。

【關鍵詞】 茶堿;鹽酸麻黃堿;醋酸地塞米松;醋酸潑尼松;薄層色譜法;高效液相色譜法

哮喘病在我國是一種常見疾病，其發病率較高。有些藥廠為了謀利，宣稱自己生產的是純中藥制劑，并大肆宣揚其“特效、速效”，且無毒副作用，但其中往往非法添加了化學成分，常見的有茶堿、鹽酸麻黃堿、醋酸地塞米松、醋酸潑尼松。為了有效打擊這種制假摻假的不法行為，保護服藥患者用藥安全，筆者建立了對以上4種成分的薄層色譜法和高效液相色譜法檢出方法，并對實際藥品進行了檢測。

1 儀器與試藥

Sartorius R200D電子分析天平，硅膠GF254薄層板，島津LC-20AT型高效液相色譜儀。對照品：茶堿、鹽酸麻黃堿、醋酸地塞米松、醋酸潑尼松均由中國藥品生物制品檢定所提供。供試品A：清肺消咳顆粒(來源：某軍隊醫院自制制劑，批號：081012)。供試品B：利肺片(來源：長春某藥業有限公司，批號：20080902)。所用試劑：甲醇、三氯甲烷、乙醇、醋酸乙酯、濃氨均為分析純，乙腈為色譜醇，水為純化水。

2 方法與結果

2.1 薄層色譜法

2.1.1 對照品溶液和供試品溶液的制備

對照品溶液的制備：稱取茶堿、鹽酸麻黃堿、醋酸地塞米松、醋酸潑尼松對照品各適量，分別加甲醇使溶解，制成每1ml中約含1mg的溶液，作為對照品溶液。供試品溶液的制備:稱取供試品A一日口服量3袋，供試品B一日口服量6片，置乳缽中研細，分別加甲醇適量，超聲10min使溶解，過濾，取續濾液作為供試品A溶液和供試品B溶液。

2.1.2 薄層分析

分別用定量毛細管吸取茶堿對照品溶液、鹽酸麻黃堿對照品溶液、醋酸潑尼松對照品溶液、醋酸地塞米松對照品溶液，供試品A溶液、供試品B溶液、四種對照品(1：1：1：1)混合溶液5μl，在距GF254薄層板底邊1cm處點樣，以三氯甲烷-水飽和的醋酸乙酯-乙醇-濃氨(30：10：6：0.5)為展開劑，當展開距為7cm時，取出薄層板，在空氣中揮干后，置254nm紫外燈下檢視，檢視后立即噴茚三酮溶液進行顯色。

2.1.3 結果

見圖1。供試品A溶液和供試品B溶液均未有斑點出現。圖1 薄層色譜法1.茶堿對照品溶液;2.鹽酸麻黃堿對照品溶液;3.醋酸地塞米松對照品溶液;4.醋酸潑尼松對照品溶液;5.供試品A溶液;6.供試品B溶液;7.四種對照品(1：1：1：1)混合溶液

2.2 高效液相色譜法

2.2.1 茶堿-鹽酸麻黃堿

2.2.1.1 色譜條件

色譜柱ZORBAX C18 (4.6mm×250mm，5μm);流動相：乙腈-水(0.02mol/L NH3 H2O)=10：90;流速為1ml/min;檢測波長為215nm;進樣量為5μl。

2.2.1.2 對照品溶液的制備

稱取茶堿、鹽酸麻黃堿對照品各適量，分別加甲醇使溶解，然后混合制成每1ml中約含1mg的溶液，作為對照品溶液。

2.2.1.3 供試品溶液的制備

同薄層色譜法“2.1.1”制備方法。

2.2.1.4 混合溶液的制備

將對照品溶液與供試品溶液以1:1混合后，作為混合溶液。

2.2.1.5 高效液相色譜法分析

對照品溶液中，茶堿的出峰時間為6.3min，鹽酸麻黃堿的出峰時間為8.7min，混合溶液中同樣發現在相同時間出峰的色譜峰，并且此峰與其他雜質峰也能得到較好分離，而供試品溶液中未發現相同時間出峰的色譜峰。其中供試品A溶液的高效液相色譜圖，見圖2。

2.2.2 醋酸地塞米松-醋酸潑尼松

2.2.2.1 色譜條件

色譜柱ZORBAX C18 (4.6mm×250mm，5μm);流動相：乙腈-水=45：55;流速為1ml/min;檢測波長為250nm;進樣量為5μl。

2.2.2.2 對照品溶液的制備

稱取醋酸地塞米松、醋酸潑尼松對照品各適量，分別加甲醇使溶解，混合后制成每1ml中約含1mg的溶液，作為對照品溶液。

2.2.2.3 供試品溶液的制備

同薄層色譜法“2.1.1”制備方法。

2.2.2.4 混合溶液的制備

同高效液相色譜法“2.2.1.4”制備方法。

2.2.2.5 高效液相色譜法分析

對照品溶液中，醋酸地塞米松的出峰時間為4.2min，醋酸潑尼松的出峰時間為7.1min，混合溶液中同樣發現在相同時間出峰的色譜峰，并且此峰與其他雜質峰也能得到較好分離，而供試品溶液中未發現相同時間出峰的色譜峰。其中供試品A溶液高效液相的色譜圖，見圖3。 圖2 高效液相色譜圖圖3 高效液相色譜圖3 討論薄層分析中，先將硅膠GF254薄層板置于254nm紫外燈下檢視，是因為茶堿、醋酸地塞米松、醋酸潑尼松可以在紫外燈下觀察到熒光斑點;檢視后立即噴茚三酮溶液，是讓鹽酸麻黃堿進行顯色，鹽酸麻黃堿在紫外燈下無法觀察到熒光斑點。薄層色譜法試驗通過比較供試品和對照品的熒光斑點，確保了定性結果的準確性，整個分析方法具有簡便的特點，并且斑點清晰，專屬性及重現性好;高效液相色譜法比薄層色譜法更加靈敏、準確、可靠，因此，在使用薄層色譜法檢測出某成分的存在后，可進一步使用高效液相色譜法進行確認。利用薄層色譜法快速檢驗出假劣藥品方法簡便、快速、實用性強，所用的薄層板可以市購，也可以自己制備，比較適用于基層單位對藥品的快速檢驗。薄層色譜法和高效液相色譜法都可作為哮喘類中藥制劑中擅自添加茶堿、鹽酸麻黃堿、醋酸地塞米松、醋酸潑尼松的有效鑒別方法，能為此類假藥的查處提供有力的技術參考依據。