HPLC法測定20種中藥飲片中蘆丁的含量
葛爾寧
1.6 線性范圍 精密吸取3種蘆丁對照品稀釋液各5μl 進(jìn)樣(流動相中的乙腈和水的比例視藥材的峰型而定,其他條件不變。對上述含蘆丁的20種藥材每種都作出其相應(yīng)的回歸方程,這里僅列出3個特殊點(diǎn)上的回歸方程Y1、Y2和Y3),記錄峰面積,重復(fù)3次取平均值。以對照品溶液濃度(X)與其相應(yīng)峰面積(Y)求得回歸方程和相關(guān)系數(shù)為: Y1=1.484×106X+1420,r=0.9999。(乙腈∶水=30∶70) Y2=1.405×106X+1685,r=0.9998。(乙腈∶水=20∶80) Y3=1.316×106X+1329,r=0.9999。(乙腈∶水=10∶90) 線性范圍:0.0095μg~0.3800μg 1.7 回收率測試 稱取符合定性要求的20種樣品粉末各2g 3份,置60只100ml量瓶中,選擇3種上述稀釋的對照品溶液,分別加入1ml,同樣品處理方法處理后進(jìn)樣,記錄峰面積,同時(shí)以同種相同量對照品稀釋液直接進(jìn)樣的峰面積為對照,計(jì)算回收率。測得20種試液的平均回收率見表1,RSD值見表1中RSD1。 1.8 精密度、重復(fù)性及穩(wěn)定性測試 取標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液中的一種,精密吸取5μl,在各色譜條件下連續(xù)進(jìn)樣5次,測得峰面積積分值的RSD見表1中RSD2;取上述20種樣品待測液,各精密吸取5μl,連續(xù)進(jìn)樣5次,測得峰面積積分值的RSD見表1中RSD3;取上述20種樣品待測液,每隔4h各精密吸取5μl進(jìn)樣,連續(xù)5次,測得峰面積積分值的RSD見表1中RSD4。
注:*屬新發(fā)現(xiàn)
2 討論 曾在不同波長區(qū)域考察上述20種混合樣品中蘆丁峰的重疊效應(yīng),結(jié)果表明:在各個波段各被測混合樣品中蘆丁峰的重疊效應(yīng)均很好,未發(fā)現(xiàn)重疊峰中有肩峰出現(xiàn),效果同樣滿意。 該實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在許多中藥材中都含有較高的黃酮類成分蘆丁,一些過去未曾報(bào)道的現(xiàn)象也具一定的臨床指導(dǎo)意義,如冬桑葉中的蘆丁含量要遠(yuǎn)高于夏桑葉,紫桑葚在某方面的藥效可能高于青桑葚等,(冬桑葉、夏桑葉、青桑葚和紫桑葚采自同一棵桑樹)一些從未建立過化學(xué)成分信息的藥材如斑葉蘭等,其成分含量有了一定的定位。該檢測蘆丁的實(shí)驗(yàn)方法簡便、靈活可靠,完全可作為上述20種中藥材之質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測的一種方法。
1 陳德昌.中藥化學(xué)對照品工作手冊.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2000,96. 2 孫文基,謝世昌.天然藥物成分定量分析.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2003,400-403. 3 鄭虎占,董澤宏,佘靖,等.中藥現(xiàn)代研究與應(yīng)用.北京: 學(xué)苑出版社,1998,第一卷-第五卷. 4 肖培根,李大鵬,楊士林,等.新編中藥志. 北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2002,第一卷-第三卷.