穩定表達人乳頭瘤病毒16E7蛋白HaCaT細胞株的建立
摘要：目的建立穩定表達人乳頭瘤病毒（HPV）16E7蛋白的HaCaT細胞株。方法利用PCR及酶切技術擴增出CaSki細胞中HPV16E7基因并定向克隆到真核細胞表達載體pcDNA3．1（＋）中．構建真核表達質粒pcDNA3．1（＋）-HPV16E7。將重組質粒轉染人HaCaT細胞，經G418篩選穩定表達HPV16E7蛋白的細胞株并予以鑒定。結果經酶切、測序鑒定構建pcDNA3．1（＋）-HPV16E7成功。RT—PCR擴增產物經瓊脂糖凝膠電泳后檢測到HPV16E7mRNA表達的特異性297bp條帶；Western印跡可檢測到E7蛋白穩定表達。結論成功構建m穩定表達HPV16E7蛋白的HaCaT細胞株。
注: 保護知識產權,如需閱讀全文請聯系中華皮膚科雜志社
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