【摘要】 目的 觀察抗生育膠囊抗生育情況。方法通過(guò)應(yīng)用口服中草藥節(jié)育膠囊對(duì)雄性育齡大鼠進(jìn)行用藥前后睪丸生殖上皮細(xì)胞形態(tài)變化和血漿睪丸酮測(cè)定，觀察藥物抗生育情況。結(jié)果挑選出用藥前生育率達(dá)到100%的雌雄大鼠，觀察用藥后生育情況，結(jié)果生育率明顯下降，只有12%。血清睪酮用藥組較對(duì)照組明顯下降（P<0.001）。結(jié)論 說(shuō)明中草藥抗生育膠囊生育調(diào)控作用確切，有一定研究?jī)r(jià)值。

【關(guān)鍵詞】 中草藥； 生育調(diào)控； 物質(zhì)基礎(chǔ)研究

當(dāng)前，伴隨著世界人口結(jié)構(gòu)的變化和我國(guó)計(jì)劃生育政策的逐漸實(shí)施，推廣應(yīng)用安全有效、簡(jiǎn)便經(jīng)濟(jì)的新型節(jié)育技術(shù)、新方法和避孕藥物，開(kāi)發(fā)和利用傳統(tǒng)中草藥避孕方劑，提高避孕普及率、有效率和安全性，對(duì)男女生殖生育領(lǐng)域的研究已經(jīng)逐漸成為社會(huì)發(fā)展領(lǐng)域科技發(fā)展重點(diǎn)、熱點(diǎn)。然而我國(guó)傳統(tǒng)方法上節(jié)育環(huán)、口服激素類避孕藥等都把負(fù)擔(dān)加在婦女身上，有時(shí)不適應(yīng)者還有一定副作用，給夫妻生活帶來(lái)許多不便。如炔諾酮類避孕藥長(zhǎng)期使用，毒副反應(yīng)甚多。為了尋找有效、無(wú)毒、方便的避孕藥，近10年來(lái)，很多學(xué)者進(jìn)行了中草藥抗生育藥理研究，從中發(fā)掘出了很多有效的抗生育單味中草藥，中藥藥理作用研究表明一些單味中藥具有干擾精子生成或殺滅精子的作用，而復(fù)方中草藥抗生育研究國(guó)內(nèi)外都是空白，為此開(kāi)展男性抗生育研究以尋求安全可靠、副作用小的不含激素的中草藥復(fù)方制劑，以便更好地提高夫妻生活質(zhì)量，進(jìn)一步推進(jìn)我國(guó)計(jì)劃生育政策。

1 器材與方法

1.1 節(jié)育膠囊組方及制備節(jié)育膠囊由蛇床子、烏梅、苦參、川楝子等數(shù)味中藥按君臣佐使組方而成。按現(xiàn)代工藝提取，濃縮干燥制成膠囊備用。

1.2 動(dòng)物選取性成熟Wister大鼠40只，其中雌鼠10只，雄鼠30只，體重280～330 g。自北京軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院動(dòng)物養(yǎng)殖中心購(gòu)進(jìn)（動(dòng)物合格證號(hào)：清潔級(jí)， 軍醫(yī)動(dòng)字第B 98013），本院動(dòng)物房常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲食，1周后用于實(shí)驗(yàn)。

1.3 給藥方法按雄（♂）大鼠體重灌胃給藥，對(duì)照組灌服生理鹽水，按體重 1 ml·（100 g）-1·d-1灌服；用藥組灌服節(jié)育膠囊（用時(shí)配成生藥1 g/ml），按體重1 ml·（100 g）-1·d-1灌服。

1.4 生育率觀察用藥前后雌雄以1∶1合籠交配(21 d為1個(gè)生育周期)，計(jì)算生育率。

1.5 組織學(xué)觀察對(duì)照組與用藥組分別取睪丸、附睪和輸精管等組織進(jìn)行大體標(biāo)本觀察，然后將標(biāo)本放入10%甲醛中固定，脫水，包埋，常規(guī)HE染色，光鏡觀察。

1.6 用藥前后血清睪酮測(cè)定給藥前與給藥后分別取大鼠尾靜脈血，放免法測(cè)定血清睪丸酮的水平。

1.7 試劑戊巴比妥鈉、多聚甲醛、甲醛、血清睪丸酮試劑盒，購(gòu)自解放軍總院開(kāi)發(fā)中心放免所。

1.8 儀器回旋切片機(jī)、離心機(jī)、電子天平、722分光光度計(jì)、光學(xué)顯微鏡、Olympus 顯微鏡、放免儀等。

2 結(jié)果

2.1 光鏡觀察結(jié)果對(duì)照組大鼠曲精細(xì)管生精細(xì)胞排列整齊；用藥組大鼠曲精細(xì)管生精細(xì)胞排列紊亂，腔內(nèi)有少量脫落的生精細(xì)胞，并見(jiàn)多核巨噬細(xì)胞的形成，偶見(jiàn)變態(tài)期精子細(xì)胞頭部增大深染。發(fā)現(xiàn)部分睪丸曲精細(xì)管上皮出現(xiàn)排列紊亂，層次減少，精子細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)較大的空泡，線粒體腫脹，變態(tài)期精子頂體膜增厚，皺縮。精子數(shù)量減少，活力下降，畸變率增高，說(shuō)明節(jié)育膠囊對(duì)雄性大鼠有較強(qiáng)的抗生育的能力。

2.2 血清睪酮測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。用藥組較正常對(duì)照組血清睪酮下降明顯（P<0.001）。表1 血清睪酮測(cè)定結(jié)果（略）

2.3 用藥組與正常對(duì)照組生育率情況結(jié)果見(jiàn)表2。表2 兩組生育率情況比較（略）

3 討論

大鼠屬哺乳動(dòng)物，生育力旺盛，是研究節(jié)育藥物的理想模型，且雌雄容易辨認(rèn)，但近年研究表明，精子發(fā)生和成熟機(jī)理尚未完全闡明，這給精確評(píng)價(jià)睪丸功能帶來(lái)了困難，所以我們選擇方向主要從生殖細(xì)胞的改變和激素水平方面來(lái)研究，在一定程度上反應(yīng)了其抗生育的情況。已往研究已經(jīng)證實(shí)，筆者用的節(jié)育膠囊中單味藥具有抑制或殺死精子的有效成分，如賈氏［1］用川楝子油給SD大鼠兩側(cè)附睪尾部注射100 μl/側(cè)，10 d后將上述大鼠分別與有生育力雌鼠進(jìn)行交配，結(jié)果用藥組及對(duì)照組大鼠生育率分別為13.3%和90%。用藥組5周時(shí)組織學(xué)檢查附睪及輸精管均無(wú)梗阻改變、睪丸形態(tài)正常，附睪出現(xiàn)輕度炎癥，6周時(shí)睪丸曲細(xì)精管口徑縮小，F(xiàn)CM檢查表明川楝子油可抑制睪丸生精細(xì)胞的生成，刺激非生精細(xì)胞使其合成代謝增加。故而得出附睪注射川楝子油可影響睪丸生精功能，激活睪丸間質(zhì)細(xì)胞使其功能增強(qiáng)，產(chǎn)生局部免疫性不育，而不影響雄性大鼠的睪丸酮分泌及性功能。朱氏［2］用蛇床子浸膏粉用生理鹽水配成20%～40%混懸液，離心，取上清液過(guò)濾，濾液作殺精實(shí)驗(yàn)，結(jié)果20 s內(nèi)抑制人精子的最低有效濃度是30%液，每毫升精液與不同劑量的浸膏粉混合，其抑制精子活動(dòng)的最低有效劑量為250～300 mg。應(yīng)用掃描及透射電鏡對(duì)經(jīng)蛇床子［3］作用后的人類精子結(jié)構(gòu)的變化進(jìn)行研究，其結(jié)果表明，其對(duì)人類精子的表面形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)均有明顯的破壞和損傷作用。另外苦參堿［4］可通過(guò)抑制和殺死精子發(fā)揮抗生育活性；從中藥烏梅［5］中經(jīng)化學(xué)提純、分析、確定其殺精有效成分為枸櫞酸，其最有效殺精濃度為0.09%(0.9 mg/ml)，經(jīng)透射電鏡觀察枸櫞酸殺傷精子的主要靶結(jié)構(gòu)在于精子頂體、質(zhì)膜、核膜及線粒體；蚤休乙醇［6］提取物對(duì)大鼠精子殺精有效濃度為3 mg/ml，小鼠為1.5～3 mg/ml。其粗皂苷對(duì)大鼠和小鼠精子殺精有效濃度均為30 μg/ml，對(duì)人精子殺精有效濃度為500～1000μg/ml。這些研究成果為開(kāi)展中藥復(fù)方研究奠定了基礎(chǔ)。經(jīng)初步觀察效果肯定，說(shuō)明中草藥復(fù)方抗生育研究可行。此項(xiàng)研究為尋求安全、可靠、副作用小的非激素類天然抗生育制劑奠定了基礎(chǔ)，對(duì)進(jìn)一步推進(jìn)我國(guó)計(jì)劃生育政策有積極意義，具有開(kāi)發(fā)前景。