【摘要】 目的研究清咽排毒顆粒在解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、止咳、祛痰、體外抗菌、體外抗病毒等方面的作用，為其臨床用于風(fēng)熱型急性咽炎提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法選用2，4二硝基苯酚致大鼠發(fā)熱法、熱板法、二甲苯所致小鼠耳廓腫脹法、氨水引咳法、小鼠酚紅排泄法、最低抑菌濃度法和雞胚內(nèi)抗病毒法。結(jié)果清咽排毒顆粒對(duì)2，4二硝基苯酚所致大鼠發(fā)熱有顯著的解熱作用；對(duì)熱板法引起的疼痛具有明顯的鎮(zhèn)痛作用；對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹有明顯的抑制作用；能明顯抑制氨水引起的小鼠咳嗽，促進(jìn)小鼠氣管酚紅排泄；對(duì)金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、肺炎克雷伯氏菌、大腸桿菌、甲型流感病毒H1N1有一定抑制作用。結(jié)論清咽排毒顆粒具有解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、止咳、祛痰、體外抗菌、體外抗病毒等方面的作用。

【關(guān)鍵詞】 清咽排毒顆粒； 解熱； 鎮(zhèn)痛； 抗炎； 止咳； 祛痰； 抗菌； 抗病毒

Abstract：ObjectiveTo study the pharmacodynamic actions of Qingyan Paidu Granule about antipyretic， analgesic， anti-inflamatory， antitussive， expectorant， bacteriostasis， and antivirus. MethodsAntipyretic action was evaluated with rat pyrogentic test induced by 2，4-dinitrophenol. Its analgesia action was investigated by hot plate test. Anti-inflammation action by using auricle swelling in mice caused by bimethylbenzene and antitussive effect by using cough-model in mice caused by ammonia were observed and the quantity of phenolred secreted from the mice's trachea were determined. Minimal inhibitory concentration test and antiviral effect by infecting chicken embryo with H1N1 were tested. ResultsQingyan Paidu Granule had obvious antipyretic action， analgesic action， anti-inflammationy action， antitussive action， and expectorant action; and it had some inhibitory action to staphylococci， beta-hemolytic streptococci， pneumococcus， Escherichia coli， and influenza virus A with H1N1. ConclusionQingyan Paidu Granule has evident effects of antipyretic， analgesia， anti-inflammation， antitussive， expectorant， bacteriostasis， and antivirus.

Key words：Qingyan Paidu Granule; Antipyretic; Analgesia; Anti-inflammation; Antitussive; Expectorant; Bacteriostasis; Antivirus

清咽排毒顆粒是由金銀花、野菊花、紫花地丁、牛蒡子、青蒿、牡丹皮、玄參、薄荷、甘草等組成的中藥復(fù)方制劑。主要用于風(fēng)熱型急性咽炎引起的咽干灼熱、咽痛、發(fā)熱惡寒、咳嗽咳痰。為了給臨床上的應(yīng)用提供理論上的依據(jù)，筆者對(duì)其進(jìn)行了藥效學(xué)方面的研究。

1 材料

1.1 藥物清咽排毒顆粒，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)提供，2 g/包，批號(hào)20050402。利巴韋林片，由山東魯北藥業(yè)有限公司提供，20 mg/片，批號(hào)010815；阿司匹林，由石家莊神威藥業(yè)股份公司生產(chǎn)，批號(hào)990912；消炎痛，由中山市三才醫(yī)藥集團(tuán)有限公司生產(chǎn)，25 mg/片，批號(hào)200408156；醋酸潑尼松片，由廣東華南藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，5 mg/片，批號(hào)641011；磷酸可待因片，為北京中順制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)020412；沐舒坦鹽酸氨溴索片，為上海勃林格殷格翰藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)484031。

1.2 菌株甲型流感病毒H1N1（A1京防86-1），中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒學(xué)研究所提供；金黃色葡萄球菌(ATCC6538)、乙型溶血性鏈球菌(NICBP32210)、肺炎克雷伯氏菌（ATCC13883）和大腸桿菌（O111B4），購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。

1.3 動(dòng)物SD大鼠

（醫(yī)動(dòng)字第0007724）、NIH小鼠（醫(yī)動(dòng)字第0005366號(hào)），由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 解熱作用實(shí)驗(yàn)

選用體溫波動(dòng)不超過(guò)0.2 ℃的大鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)均分為5組（n=10），分別測(cè)肛溫2次，間隔30 min，以均值作為其正常體溫。藥物組分別灌服清咽排毒顆粒1.2，0.6，0. 3 g·kg-1，陽(yáng)性對(duì)照組灌服阿司匹林0.1 g·kg-1，空白對(duì)照組灌服等體積蒸餾水。一次給藥后隨即對(duì)大鼠背部皮下注射2 %的2，4二硝基苯酚15 mg·kg-1，并于給藥后30，60，120，180，240 min測(cè)其肛溫，結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)，見(jiàn)表1。表1 清咽排毒顆粒對(duì)2，4二硝基苯酚所致大鼠發(fā)熱的影響（略）

2.2 鎮(zhèn)痛作用實(shí)驗(yàn) 將體重在(20±2)g的雌性小鼠置于(55±0.5)℃的金屬板上，以小鼠舔后足為疼痛反應(yīng)信號(hào)，以疼痛反應(yīng)潛伏期為痛閾指標(biāo)，給藥前測(cè)兩次(間隔5 min)，以其均值作為基礎(chǔ)痛閾，選擇痛閾值在5～30 s的小鼠50只，隨機(jī)均分為5組（n=10）。藥物組分別灌服清咽排毒顆粒1.2，0.6，0. 3 g·kg-1，陽(yáng)性對(duì)照組灌服消炎痛8.33 mg·kg-1，給藥1次/d，連續(xù)3 d；空白對(duì)照組灌服等體積蒸餾水。于末次給藥后1 h測(cè)痛閾值兩次(間隔5 min)，取平均值，計(jì)算前后痛閾值之差，即痛閾提高值，t檢驗(yàn)。結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3 抗炎作用實(shí)驗(yàn)

選用體重在（20±2）g小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)均分為5組（n=10）。藥物組分別灌服清咽排毒顆粒1.2，0.6，0. 3 g·kg-1，陽(yáng)性對(duì)照組灌服消炎痛8.33 mg·kg-1，給藥1次/d，連續(xù)3 d；空白對(duì)照組灌服等體積蒸餾水。于末次給藥后30 min，每鼠左耳涂以100%二甲苯0.02 ml。1 h后頸椎脫臼處死動(dòng)物，剪下雙耳，用打孔器在相同部位打下耳片，稱重，以重量差異值作為腫脹程度，t檢驗(yàn)分析。結(jié)果見(jiàn)表2。表2 清咽排毒顆粒對(duì)熱刺激所致小鼠疼痛及二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響（略）

2.4 止咳作用實(shí)驗(yàn)

選用體重在(20±2)g小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)均分為5組（n=10）。藥物組分別灌服清咽排毒顆粒1.2，0.6，0. 3 g·kg-1，陽(yáng)性對(duì)照組灌服磷酸可待因30 mg·kg-1，給藥1次/d，連續(xù)5 d；空白對(duì)照組灌服等體積蒸餾水。于末次給藥后30 min，將動(dòng)物置于霧化器內(nèi)，以53kpa恒壓將氨水均勻噴霧15 s，觀察小鼠的咳嗽潛伏期和3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)（以小鼠腹肌收縮并張大口為咳嗽動(dòng)作指征），結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)分析。結(jié)果見(jiàn)表3。表3 清咽排毒顆粒對(duì)小鼠咳嗽潛伏期的影響（略）

2.5 祛痰作用實(shí)驗(yàn)［1］

選用體重在（20±2）g小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)均分為5組（n=10）。藥物組分別灌服清咽排毒顆粒1.2，0.6，0. 3 g·kg-1；陽(yáng)性對(duì)照組灌服沐舒坦鹽酸氨溴索片30 mg·kg-1，空白對(duì)照組灌服等體積蒸餾水。給藥1次/d，連續(xù)4 d。小鼠禁食16 h，于末次給藥后30 min，腹腔注射0.5%酚紅溶液0.5 ml， 30 min后頸椎脫臼處死小鼠，分離氣管，氣管插管并與注射器相連，用5 %NaHCO3溶液沖洗氣管3次，0.5 ml/次，合并沖洗液，用上述NaHCO3溶液定容至3 ml。2 000 r/min離心5 min，得到紅色上清液，用722分光光度計(jì)，波長(zhǎng)545 nm測(cè)OD值，根據(jù)酚紅的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算酚紅的排泄量。結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)，見(jiàn)表3。

2.6 體外抗菌實(shí)驗(yàn)［2］

將金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、肺炎克雷伯氏菌和大腸桿菌活化，挑選典型菌落，接種在M－H肉湯管中，置37 ℃孵箱內(nèi)培養(yǎng)24 h，并用無(wú)菌生理鹽水稀釋成含菌量約為1×107 CFU·ml-1濃度待用；取M－H瓊脂加熱溶化，采用瓊脂二倍稀釋法加入藥液（0.22 μm微孔濾膜濾過(guò)），混合均勻，傾注于平皿，做成含不同濃度的瓊脂平皿；用接種環(huán)取上述稀釋菌液一環(huán)，接種于含藥物瓊脂平板，置37 ℃孵箱中培養(yǎng)24 h，觀察結(jié)果。以無(wú)菌生長(zhǎng)的平皿中所含最低藥物濃度作為藥物的最低抑菌濃度（MIC）。結(jié)果見(jiàn)表4。表4 清咽排毒顆粒對(duì)常見(jiàn)致病細(xì)菌在體外的抑制作用（略）

2.7 體外抗病毒實(shí)驗(yàn)選擇

生長(zhǎng)良好的10日齡活雞胚，隨機(jī)均分為4組。藥物實(shí)驗(yàn)組設(shè)3個(gè)濃度（140，70，35 mg/ml），分別取2 ml接種至雞胚尿囊腔；陽(yáng)性藥物組取利巴韋林（100，50 mg/ml）0.2 ml接種至雞胚尿囊腔；病毒對(duì)照組接種生理鹽水0.2 ml；正常雞胚對(duì)照組接種生理鹽水0.3 ml。接種藥物后再接種100 EID50流感病毒液0.1 ml。雞胚注射完畢后，均用溶化的石蠟封閉注射孔，置35 ℃溫箱中培養(yǎng)，檢視2次/d，24 h內(nèi)死亡者棄去，至48 h，將存活的雞胚移至4 ℃冰箱過(guò)夜，次日分別收集雞胚尿囊液，用0.5 ％雞紅細(xì)胞進(jìn)行定性和定量血球凝集試驗(yàn)。將各給藥組的雞胚尿囊液血凝測(cè)定（HA）實(shí)驗(yàn)結(jié)果與病毒對(duì)照組進(jìn)行比較。結(jié)果顯示，140，70 mg·ml-1濃度的清咽排毒顆粒對(duì)100 EID50流感病毒H1N1有明顯的抑制作用。

3 討論

以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，清咽排毒顆粒不同劑量組對(duì)2，4二硝基苯酚所致大鼠發(fā)熱均有顯著的解熱作用；高、中劑量組對(duì)熱板法引起的疼痛具有一定的鎮(zhèn)痛作用；對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹有明顯的抑制作用；能明顯抑制氨水引起的小鼠咳嗽，促進(jìn)小鼠氣管酚紅排泄；對(duì)金黃色葡萄球菌殺菌效應(yīng)最高，對(duì)肺炎克雷伯氏菌、大腸桿菌作用較弱；高、中劑量組對(duì)甲型流感病毒H1N1有一定抑制作用。因此，清咽排毒顆粒可用于風(fēng)熱型急性咽炎，具有良好開(kāi)發(fā)前景。

清咽排毒顆粒是由金銀花、野菊花、紫花地丁、牛蒡子、青蒿、牡丹皮、玄參、薄荷、甘草等多味中藥組成，其中多味藥材含揮發(fā)性有效成分，如金銀花、野菊花、紫花地丁、薄荷，故在進(jìn)行體外抗菌、抗病毒實(shí)驗(yàn)時(shí)不宜進(jìn)行高壓消毒，宜采用0.22 μm微孔濾膜濾過(guò)。同樣，在進(jìn)行其它實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)隨用隨配，從而保證藥效的發(fā)揮。