作者：胡曉，張紅，夏春華，陳月江

【關鍵詞】 鹽酸伐昔洛韋片；阿昔洛韋；色譜法，高壓液相；藥代動力學；生物利用度

Pharmacokinetics and relative bioavailability of valaciclovir hydrochloride tablets in Chinese healthy volunteers

【Abstract】 AIM: To study the pharmacokinetics and relative bioavailability of valaciclovir hydrochloride tablets and evaluate its bioequivalence. METHODS: A single oral dose 600 mg of 2 valaciclovir hydrochloride tablets was given to 18 healthy volunteers in an open randomized crossover study. The concentration of acyclovir in plasma was determined by HPLC at different time points within 14 h following administration. The pharmacokinetic parameters were calculated by BAPP 2.0 software and the bioequivalence was evaluated by two onesided t test and 90%confidence intervals. RESULTS: The calibration curve of acyclovir was linear in the range of 0.1~4.0 μg/mL (r=0.9999)， and an intraday and interday RSD of<7.00% was observed. The concentrationtime curve after administration was best fitted to a one compartment open model， and main pharmacokinetic parameters were as follows: Tmax were (1.50±0.40) and (1.40±0.40) h; Cmax were (2.70±0.68) and (2.87±0.75) μg/mL; t1/2 were (3.00±0.65) and (3.28±0.67) h; AUC0-14 were 9.07±2.43 and 9.71±2.70 μg?h/mL. The relative bioavailability of the test preparations compared with the reference preparations was (96.4±23.7)%. There was no statistically singnificant difference in parameters Tmax， t1/2， Cmax， MRT， AUC0-14 and AUC0-∞ between the 2 products (P>0.05). CONCLUSION: The 2 valaciclovir hydrochloride tablets were bioequivalent. 【Keywords】 valaciclovir hydrochloride tablet; acyclovir; chromatography， high pressure liquid; pharmacokinetics; biological availability

【摘要】 目的： 研究鹽酸伐昔洛韋片在健康人體的藥代動力學和相對生物利用度，為臨床合理用藥提供依據. 方法： 采用雙周期、單中心、開放、自身交叉對照的研究方法，18例健康志愿者隨機分為兩組，單次，交叉口服鹽酸伐昔洛韋片600 mg后，以HPLC法測定血漿中阿昔洛韋的濃度，采用BAPP2.0軟件進行數據處理，計算藥代動力學參數. 結果： HPLC法測定阿昔洛韋的線性范圍為0.1~4.0 μg/mL(r=0.9999)，日內和日間RSD均小于7.00%. 試驗與參比制劑的藥時曲線可用一室模型擬合，兩者主要藥代動力學參數Tmax分別為(1.50±0.40)，(1.40±0.40) h; Cmax分別為(2.70±0.68)，(2.87±0.75) μg/mL. t1/2分別為(3.00±0.65)，(3.28±0.67) h；AUC0-14分別為(9.07±2.43)，(9.71±2.70) μg?h/mL. 兩種鹽酸伐昔洛韋片主要藥動學參數間均無顯著性差異(P>0.05). 供試制劑對參比制劑的相對生物利用度為 (96.4±23.7)%. 結論： 供試制劑和參比制劑具有生物等效性.

【關鍵詞】 鹽酸伐昔洛韋片；阿昔洛韋；色譜法，高壓液相；藥代動力學；生物利用度

0引言

鹽酸伐昔洛韋（valaciclovir hydrochloride）是阿昔洛韋（acyclovir）的L纈氨酸酯鹽酸鹽，為阿昔洛韋的前體藥物，口服后在體內迅速轉化為阿昔洛韋而發揮抗病毒作用. 與阿昔洛韋相比，鹽酸伐昔洛韋具有水溶性好，口服吸收迅速，生物利用度高，血漿半衰期長等藥代動力學特點. 在臨床上用于水痘，帶狀皰疹及Ⅰ型，Ⅱ型單純皰疹病毒感染，包括初發和復發的生殖器皰疹病毒感染的治療，具有起效快，療效好，用藥量小，服藥次數少，療程短，不良反應少等優點［1-3］. 本研究對國內兩廠家生產的鹽酸伐昔洛韋片進行了藥代動力學和生物等效性評價，旨在為臨床合理用藥提供依據.

1材料和方法

1.1材料① 儀器： LC2010A高效液相色譜儀，日本島津；GS15R貝克曼高速冷凍離心機，XW80A旋渦混合器，Sartorius電子天平，臺灣艾柯實驗室專用超純水機等. ② 試劑和藥品： 甲醇，庚烷磺酸鈉均為色譜純，購自山東禹王實業有限公司；十二烷基磺酸鈉和醋酸鈉均為分析純，購自上海試劑一廠；試驗用水為符合美國F900實驗室標準的超純化水；供試制劑鹽酸伐昔洛韋片(300 mg/片，批號： 040401)由宜都東陽光制藥有限公司研制；參比制劑鹽酸伐昔洛韋片(300 mg/片，批號： 050104) 由麗珠集團麗珠制藥廠研制；阿昔洛韋標準品購自中國藥品生物制品檢定所，含量為99.6%(批號： 630200001). ③ 色譜條件： 色譜柱為Diamonsil C18柱（5 μm，4.6 mm×150 mm，迪馬公司）；流動相為甲醇∶水（含0.001 mol/L庚烷磺酸鈉，0.0004 mol/L十二烷基磺酸鈉及0.003 mol/L醋酸鈉，pH為3.9）=5∶95，流速為1.0 mL/min，紫外檢測波長為252 nm，柱溫為28℃. 1.2方法 1.2.1血漿樣品處理取血漿0.2 mL，加入100 mL/L三氯醋酸0.2 mL，旋渦混勻1 min，19 000 g離心5 min后，取上清液30 μL進樣. 1.2.2標準曲線的制備配制成含阿昔洛韋標準品0.1， 0.2， 0.4， 0.8， 1.6， 3.2和4.0 mg/L系列血樣，分別按血漿樣品處理方法處理后進樣. 將測得的峰面積(As)對濃度(C)進行直線回歸，得阿昔洛韋標準曲線及其回歸方程(n=5)，血漿阿昔洛韋的線性范圍為0.1~4.0 mg/L，回歸方程為As=58196C-497.77， r=0.9999，最低定量濃度為0.1 mg/L. 1.2.3回收率試驗精密配制含阿昔洛韋3.2，0.8和0.2 mg/L的系列血樣，各濃度均為5份，按1.2.1的方法操作，另配制相應濃度的標準溶液，不經萃取直接以等量進樣，分別測其峰面積，兩組峰面積進行比較，計算血漿中阿昔洛韋的絕對回收率. 再精密配制濃度為3.2，0.8和0.2 mg/L阿昔洛韋標準血樣各5份，按1.2.1的方法操作進樣，以標準曲線方程計算其檢出量與加入量的比值，得相對回收率(表1).

表1人血漿中阿昔洛韋回收率（略）

RSD： 相對標準差.

1.2.4精密度試驗在標準曲線范圍內，選擇3.2， 0.8， 0.2 mg/L 3個濃度的阿昔洛韋標準血樣，按1.2.1的方法操作，每一濃度制備并測定5個樣品，3 d連續制備并測定3個分析批，求得日內RSD分別為5.00%，3.85%，5.10%；日間RSD分別為5.26%，6.50%，6.84%. 1.2.5受試者及試驗設計18名男性健康志愿者，年齡（21.2±5.3）歲，身高（170.3±3.0） cm，體質量（61.8±3.8） kg，均在標準范圍內. 獲得倫理委員會批準，志愿者簽署知情同意書. 既往無心、肝、腎、消化道、神經系統、精神異常、代謝異常等疾病，無藥物和食物過敏史. 試驗前接受全面體檢，其血、尿常規、肝、腎功能、心率、血壓、心電圖等均為正常. 試驗采用雙周期、單中心、開放、隨機、自身交叉對照的研究方法，將18例受試者隨機分為A，B兩組，于試驗前1 d進入Ⅰ期臨床試驗病房，統一進清淡平衡膳食，給藥前1 d晚餐后，禁食不禁水12 h后，于次日晨分別服用供試制劑或參比制劑600 mg，用200 mL溫開水送服. 于服藥前（0 h）及服藥后0.5， 1.0， 1.5， 2.0， 3.0， 4.0， 5.0， 6.0， 8.0， 10.0， 12.0和14.0 h采集上肢靜脈血4 mL至肝素化試管中，3000 rpm離心10 min，分離出血漿置-20℃冷凍保存，14 d內待測. 交叉服藥前有1 wk洗凈期.

2結果

2.1色譜行為在上述色譜條件下，獲得給藥前空白血漿、 空白血漿加標準阿昔洛韋及受試者服用鹽酸伐昔洛韋片后的血漿樣品色譜圖（圖1），可見阿昔洛韋保留時間約為13.5 min，各峰分離良好，無雜峰干擾測定. 2.2藥代動力學18名受試者單次口服鹽酸伐昔洛韋片受試制劑或參比制劑600 mg后平均藥時曲線均符合一房室模型(圖2). 供試制劑和參比制劑的主要藥代動力學參數分別為： Tmax (1.50±0.40)和(1.40±0.40) h; T1/2(ke) (3.00±0.65)和(3.28±0.67) h. Cmax (2.70±0.68)和(2.87±0.75) mg/L. 平均滯留時間（MRT ）(4.11±0.55)和(4.29±0.67 ) h. AUC0-14 (9.07±2.43)和(9.71±2.70) mg/L， AUC0-∞(9.66±2.42)和(10.36±2.75) mg/L.

2.3生物等效性評價兩制劑藥代動力學參數AUC0-t， Cmax經對數轉換，進行方差分析和雙向單側t檢驗，Tmax取實測值進行非參數秩和檢驗. 結果表明l n(AUC0-t)， l n(Cmax)在制劑間、周期間差異均無統計學意義，而個體間差異有統計學意義. AUC0-t的［12α］置信區間為85.25%～103.27%，在80%~125%內；供試制劑和參比制劑的相對生物利用度為(96.4±23.7)%. Cmax的［12α］置信區間為86.00%～104.02%，在70%~143%內，表明兩制劑具有生物等效. Tmax非參數檢驗結果差異無統計學意義S=16.5>S0.05(10)=8， P>0.05.

A： 空白血漿；B： 空白血漿＋阿昔洛韋標準品；C： 受試者口服鹽酸伐昔洛韋后4 h的血樣. 圖1阿昔洛韋血漿樣品分析色譜圖 （略）

圖2健康志愿者口服600 mg鹽酸伐昔洛韋片的平均藥時曲線（略）

3討論

阿昔洛韋體內濃度測定多采用高效液相紫外檢測法，由于水溶性大，難以采用液液萃取法將阿昔洛韋從血漿樣品中獲得滿意的分離. 本實驗采用直接蛋白沉淀法，比較了多種蛋白沉淀劑對血樣的處理效果，結果是用等體積100 mL/L三氯醋酸沉淀蛋白效果好. 在流動相的考察中，發現在單純的甲醇水［4-6］體系中，阿昔洛韋峰形差且無法與血漿中雜質分離. 考慮到阿昔洛韋的結構特點，在甲醇水體系中加入適量離子對試劑使其成為離子對色譜，在考察中發現，單用庚烷磺酸鈉作為離子對試劑［7］，雖然阿昔洛韋峰形得到很好的改善，但還是無法與血漿中雜質完全分離. 經過摸索發現在含0.001 mol/L庚烷磺酸鈉及0.003 mol/L醋酸鈉的甲醇水體系加入0.0004 mol/L十二烷基磺酸鈉，改變流動相的選擇性，結果阿昔洛韋峰形好，保留時間恒定，且血漿中無雜峰干擾測定. 采用本方法測定血漿中阿昔洛韋的濃度在0.1~4.0mg/L濃度范圍內線性關系良好（r=0.9999），精密度和準確性均符合生物樣本分析的要求，適用于伐昔洛韋的人體藥代動力學和生物等效性研究. 本試驗供試與參比兩制劑的主要藥代動力學參數，如Cmax， AUC， Tmax， T1/2與文獻報道基本一致［6］，且差異無統計學意義，表明兩者在吸收程度及吸收速度上具有生物等效性.

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