作者：龐京團 ，胡廣林，韓彬，齊江寧，張化云

【摘要】 目的研究復方蘆薈膠囊中汞的生物利用性及配伍藥物對汞生物利用性的影響，以便認識復方蘆薈膠囊中汞對人體的健康風險。方法用L8(27)正交表設計實驗，體外消化透析法取得汞溶出率及生物可接受率數據。結果復方蘆薈膠囊中汞含量為(11.7±0.4）%(P=0.95）；復方蘆薈膠囊在胃模擬環境中汞溶出率為(1.36±0.06)%(P=0.95)，腸模擬環境下生物可接受率為(0.46±0.03)%(P=0.95)；蘆薈很顯著抑制了朱砂中汞的溶出率(P=0.95)，蘆薈使朱砂中汞生物可接受率顯著降低(P=0.90)；其他配伍藥物及藥物交互作用對汞生物利用性不顯著。結論復方蘆薈膠囊中汞含量高，生物可接受率低，長期服用會存在一定的潛在健康風險；復方蘆薈膠囊配伍時可適當增大蘆薈用量以降低其汞的生物利用性。

【關鍵詞】 配伍； 復方蘆薈膠囊； 生物可接受率； 汞

Abstract：ObjectiveTo study the bioaccessibility of mercury from Fufang Luhui Capsule，and to study the influence of different compatibility on the bioavailability of mercury. MethodsEight solutions with cinnabar were prepared using an in vitro dialysis digestion method and were analysed by L8(27)orthogonal design and the contents of mercury were determined by CV-AFS. ResultsThe content of mercury in Fufang Luhui Capsule was (11.7±0.4)%(P=0.95). The experimental results indicated that mercury dissolution rate from Fufang Luhui capsule was (1.36±0.06)%(P=0.95)，and the bioaccessibility was (0.46±0.03)%(P=0.95). As a main component of Fufang Luhui Capsule， aloe inhibited the dissolution rate of mercury in cinnabar very significantly(P=0.95)， and aloe significantly reduced the bioaccessibility of mercury in cinnabar(P=0.90). Influences of the compatibility of other drugs and drug interactions was insignificant.ConclusionThe content of mercury in Fufang Luhui Capsule is high， its bioavailibility is low， and there are still some medicinal potential health risks for long-term intake.Aloe significantly influence its bioavailability， so properly increasing the content of aloe can reduce its bioaccessibility.

Key words：Compatibility； Fufang Luhui Jiaonang； Bioaccessibility； Mercury

復方蘆薈膠囊，純中藥復方制劑，有良好的清肝瀉熱、潤腸通便等功效，在臨床上一直用于心肝火盛，煩躁失眠等癥。2006年英國藥物安全機構稱復方蘆薈膠囊汞含量超過英國標準 11.7 萬倍［1］，其配方含有朱砂，是導致此次事件發生的重要原因。對于重金屬，只有溶出且被利用的部分才能作用于人體而產生毒副作用，因此對重金屬毒副作用的評價，不僅要測定重金屬總含量，更要測定其生物可接受量（bioaccessible amount）。目前FDA和WHO均制定了類似食品、蔬菜以及茶葉等產品的重金屬允許攝入量。美國、歐盟、日本等國家及我國傳統中藥出口的東南亞地區都制定了嚴格的重金屬限量標準。但是，包括中國在內，所有針對重金屬制定的限量標準都只考慮了重金屬總量。對于礦物藥朱砂、雄黃等，一方面重金屬總量是嚴重超標的，另一方面其生物可利用性是非常低的。因而如何合理評價中藥中重金屬的安全性已經成為一個亟待解決的問題，對含重金屬進行安全性評價就具有重要的現實意義。 近年來，重金屬安全性評價已被關注，一些研究重金屬生物可接受率的科研工作已經開展。Ana I. Cabanero等［2］用體外法研究幾種魚中汞和砷的生物利用性，Iris Koch等［3］研究了牛黃解毒片中砷的生物可接受率，但復方蘆薈膠囊等含朱砂中成藥的研究還較少。本研究在已有工作，體外消化透析法測定水飛朱砂中汞的生物可接受率實驗條件確定［4］的基礎上，對復方蘆薈膠囊中汞的溶出率及生物可接受率進行了測定，并研究了配伍藥物及交互作用對朱砂中汞生物利用性的影響。

1 儀器與材料

1.1 儀器

SYG-Ⅱ型智能冷原子熒光測汞儀（杭州大吉光電儀器有限公司）；MRG-70分裝式高壓密封消化罐（沈陽森華理化儀器研究所）；DL-5-B離心機（上海安亭科學儀器廠）；pHS-25型酸度計（上海偉業儀器廠）；THZ-82型水浴恒溫振蕩器（江蘇天由有限公司）；101-OS型數顯式電熱恒溫干燥箱（上海滬越實驗儀器有限公司）；FA1004N電子天平（上海精密科學儀器有限公司天平儀器廠）。

1.2 試劑與溶液

胃蛋白酶（上海國藥集團化學試劑有限公司，BR）；胰蛋白酶（上海楷洋生物技術有限公司，BR)；豬膽鹽（上海國藥集團化學試劑有限公司，BR）；透析袋截留分子量（Molecular Weight Cutoff）12 000～14 000 Da（美國進口分裝）；HNO3，HF，HCl，SnCl2為GR級試劑；KH2PO4，NaHCO3， NaOH為AR級試劑；水飛朱砂（按2005年《中國藥典》的硫氰酸銨法測得HgS含量98.2％）；復方蘆薈膠囊（上海復星臨西藥業有限公司）；琥珀、蘆薈、青黛購于海口同仁堂藥店；汞標準貯備液（100 μg·ml-1，國家環保總局標準樣品研究所）；楊樹葉標準物質（GBW 07603）由地礦部物化探研究所提供；實驗用水為二次亞沸蒸餾水。

2 方法

2.1 復方蘆薈膠囊中汞含量測定

硫氰酸銨滴定法［5，6］測定復方蘆薈膠囊中汞含量。

2.2 胃蛋白酶等溶液的配制

2.3 汞溶出率及生物可接受率測定

2.4 復方蘆薈膠囊中各配伍組合對朱砂中汞生物利用性影響 縮進采用L8（27）正交表設計實驗，每組加入朱砂質量為0.30 g，加入其他藥物質量之和為0.20 g，同時加入50 ml人工胃液，以保證實驗中液/固比為100［4］。結果見表5。

3 結果

3.1 復方蘆薈膠囊中汞含量測定

汞量法測得復方蘆薈膠囊中汞含量為（11.7±0.4）%（n=8，P=0.95）與文獻報道復方蘆薈膠囊［6］相符。《中國藥用植物及制劑進出口綠色行業標準》（WM/T2-2004）規定Hg的限量指標：Hg≤0.20 mg·g-1；歐盟委員會法規（EC）No 1881/2006 規定食品中汞限量指標：部分水產品0.5 mg·g-1，大西洋鯰魚、鰻魚等魚類為1 mg·g-1。對照WM/T2-2004指標，復方蘆薈膠囊超出汞限量指標58.6萬倍；有些歐洲國家用食品標準對中藥及制劑進行限定，對照（EC）No 1881/2006，取最高限量值1 mg·g-1，復方蘆薈膠囊超出汞限量指標11.7萬倍。

3.2 復方蘆薈膠囊中汞溶出率及生物可接受率測定 體外消化透析法［4］測得復方蘆薈膠囊中汞的溶出率為（1.36±0.06）%（P=0.95），生物可接受率為（0.46±0.03）%（P=0.95）。

由體外消化透析實驗結果知：復方蘆薈膠囊每1粒為0.50 g，含汞量為58.5 mg，其溶出率約為1.36%，生物可接受率約為0.46%，故溶出汞量約為0.80 mg，生物可接受汞量約為0.27 mg。人體內汞量達到100 mg表現為中毒，復方蘆薈膠囊用量為1～2次/d，1～2粒/次，同時汞在人體內半衰期很長，約為65～70 d，故長期連續服用，對人體健康存在一定的威脅。

3.3 配伍藥物對朱砂中汞生物利用性的影響

朱砂、蘆薈、青黛、琥珀是復方蘆薈膠囊的主要成分，為研究配伍藥物對朱砂中汞元素生物利用性的影響，本工作選用青黛、琥珀、蘆薈為3要素，用藥、不用藥為兩個水平(見表1)；考慮兩兩交互作用，采用L8(27)正交表設計實驗。見表2。表1 因素水平（略）表2 L8(27)正交實驗及結果（略）

k1、k2、R分別表示汞溶出率的組內平均值和極差；k1*、k2*、R*分別表示汞生物可接受率的組內平均值和極差。表3 不同配伍組中朱砂中汞溶出率與生物可接受率（略）表4 汞溶出率方差分析（略）表5 汞生物可接受率方差分析（略）

表3中朱砂中汞的溶出率與生物可接受率均低于中成藥復方蘆薈膠囊中汞的溶出及生物可接受率，這可能是本工作選用的水飛朱砂與復方蘆薈膠囊中朱砂溶出特性不同所致，此外朱砂中汞的生物利用性還可能會受到配伍藥物中化學成分的影響。 結合表3、4知，蘆薈很顯著抑制了朱砂中汞的溶出 (P=0.95)，其他配伍藥物及交互作用對朱砂中汞溶出沒有顯著影響。結合表3、5知，蘆薈顯著降低了朱砂中汞生物可接受率(P=0.90)，其他配伍藥物及交互作用對朱砂中汞生物可接受率沒有顯著影響。

綜上所述，不是所有的配伍藥物和配伍藥物交互作用對朱砂中汞溶出率及生物可接受率有顯著的影響，蘆薈顯著地降低了朱砂中汞的溶出率和生物可接受率，考慮到汞的毒副作用，在保證藥效的前提下，配伍時應提高蘆薈用量，這樣有利于降低汞的健康風險。