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摘要：目的:探索Clec14a在斑馬魚胚胎期的表達(dá)及其在血管發(fā)育過程中的功能,探討該基因調(diào)控血管發(fā)育機制。方法:通過胚胎整體原位雜交技術(shù),觀察Clec14a基因在斑馬魚胚胎期的表達(dá)情況;在轉(zhuǎn)基因斑馬魚系Tg(kdrl:mCherry)和Tg(fli1a:nGFP)中,顯微注射嗎啉修飾的反義寡核苷酸(morpholinoantisense oligos)下調(diào)Clec14a基因表達(dá),同時在轉(zhuǎn)基因斑馬魚系Tg(kdrl:mCherry)中注射Clec14a-mRNA調(diào)控Clec14a基因表達(dá),利用激光共聚焦顯微鏡觀察分析斑馬魚節(jié)間血管(intersegment vessel,ISV)表型,統(tǒng)計分析內(nèi)皮細(xì)胞遷移速度和數(shù)目的變化,并應(yīng)用qRT-PCR技術(shù)檢測下調(diào)后該基因mRNA表達(dá)情況。結(jié)果:在受精后24h、48h和72h,Clec14a基因在斑馬魚腦、心臟、血管系統(tǒng)中有表達(dá);Clec14a基因表達(dá)下調(diào)導(dǎo)致ISV發(fā)育缺陷,內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目減少,抑制其遷移速度。結(jié)論:下調(diào)Clec14a基因表達(dá)能夠通過抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖和內(nèi)皮細(xì)胞遷移調(diào)控斑馬魚胚胎血管發(fā)育。

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