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單增李斯特標準菌NrdD基因插入突變株的構建

舒加樂; 鄭琳琳 上海交通大學實驗動物中心; 上海200240

摘要:利用同源重組的原理構建了單增李斯特氏菌NrdD基因插入突變株,從大腸桿菌基因組中分別擴增出NrdD基因上下游同源臂,與pKSV7質粒相連,構建成功重組突變載體pKSV7-D1D2,將其電轉入單增李斯特菌后,用氯霉素抗性平板篩選得到NrdD基因插入突變株,并對突變菌株序列測定,證明回復突變株構建成功。該突變株可在嚴格無氧環境中生存,為進一步研究NrdD基因功能、單增李斯特的致病機制和疫苗載體的研發奠定了基礎。

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