5-雜氮-2’-脫氧胞苷對三陰性乳腺癌細(xì)胞肺轉(zhuǎn)移的抑制作用
摘要:目的探討5-雜氮-2’-脫氧胞苷(5-Aza—CdR)對三陰性乳腺癌(TNBC)MDA—MB-231細(xì)胞實(shí)驗(yàn)性肺轉(zhuǎn)移的影響及其機(jī)制。方法將MDA—MB-231細(xì)胞分對照組與5-Aza—CdR處理組,分別通過半定量逆轉(zhuǎn)錄。聚合酶鏈反應(yīng)(SqRT.PCR)與甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(MSP)方法檢測乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制基因-1(BRMSl)、CXC趨化因子受體-4(CXCR4)基因的mRNA表達(dá)與啟動子區(qū)甲基化狀況。然后通過邊緣尾靜脈將2×10^5個(gè)細(xì)胞注射到每只BALB/Cnu/nu裸鼠體內(nèi)(每組5只),5周后,通過熒光定量RT—PCR(FqRT—PCR)檢測裸鼠肺組織內(nèi)目的基因HPRTmRNA豐度來確定癌細(xì)胞肺轉(zhuǎn)移程度。結(jié)果對照組與處理組細(xì)胞的BRMSl相對灰度值(IDV)分別為0與0.390±0.001,處理組BRMSlmRNA表達(dá)明顯上調(diào)(P〈0.05),5-Aza—CdR使BRMS1啟動子區(qū)甲基化的CpG島B完全去甲基化;CXCR4相對IDV分別為0.580±0.003與0.580±0.010,兩組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〉0.05),CXCR4啟動子區(qū)CpG島1的非甲基化狀態(tài)亦無明顯改變;接種對照組與處理組細(xì)胞的裸鼠肺臟HPRT、GAPDH的ct值分別為:24.75±1.55、16.19±0.69與27.61±1.67、17.48±0.96,2△△Ct0.34,轉(zhuǎn)移抑制率為66%,處理組裸鼠肺臟HPRTmRNA豐度低,轉(zhuǎn)移的癌組織較少。結(jié)論5-Aza—CdR通過去甲基化機(jī)制重新激活了腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因BRMSI的表達(dá),降低了TNBCMDA—MB-231細(xì)胞實(shí)驗(yàn)性肺轉(zhuǎn)移的能力。
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