1,2-二氯乙烷通過線粒體通路誘導人星形膠質細胞凋亡研究
摘要：目的通過篩選細胞凋亡差異表達蛋白,探討1,2-二氯乙烷（1,2-DCE）誘導人星形膠質細胞（HAs）凋亡的相關分子機制。方法以終濃度分別為0-80 mmol/L或0-40 mmol/L的1,2-DCE染毒HAs,培養24 h后,采用磷脂結合蛋白Ⅴ-異硫氰酸熒光素/碘化丙啶流式細胞技術檢測細胞凋亡,采用AAH-APO-1-2蛋白芯片篩選差異表達蛋白,采用實時熒光定量-聚合酶鏈式反應（qRT-PCR）驗證相關蛋白的差異表達基因。結果在1,2-DCE濃度為0-80 mmol/L時,隨著染毒劑量增加,HAs細胞總凋亡率升高,呈劑量-效應關系（P〈0.01）。凋亡蛋白芯片篩選出7個差異表達蛋白,其中,與對照組比較,胰島素樣生長因子結合蛋白（IGFBP）-1、IGFBP-4和細胞色素C（Cyto C）表達均上調,P27、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、B淋巴細胞瘤-2相互作用的細胞死亡中介物（BIM）和BH3交叉域死亡受體激動劑（BID）表達均下調。差異表達基因的qRT-PCR驗證結果顯示,40 mmol/L劑量組HAs中IGFBP-1、IGFBP-4和Cyto C的mRNA表達上調,與蛋白芯片的表達趨勢一致;該組HAs中Caspase-3、BIM、BID的mRNA表達也上調。結論 1,2-DCE可能通過線粒體通路誘導HAs凋亡。
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