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FOXP3 shRNA對肝癌細胞增殖、凋亡和侵襲功能的作用

歐希; 張光濤; 田佩凱; 陳景森; 林澤偉; 謝勇; 王愛紅; 劉曉平; 劉吉奎 北京大學深圳醫(yī)院肝膽胰外科; 廣東深圳518036; 深圳大學總醫(yī)院肝膽外科; 深圳市婦幼保健院乳腺科

摘要:目的研究FOXP3shRNA對肝癌細胞株SMMC-7721和MHCC-97H的增殖、凋亡和侵襲功能的影響。方法設計3種編碼FOXP3shRNA的FOXP3干擾慢病毒:sh-FOXP3-1-pGreenPuro、sh-FOXP3-2-pGreenPuro和shFOXP3-3-pgreenpuro,并分別轉(zhuǎn)染SMMC-7721和MHCC-97H2個肝癌細胞培養(yǎng)體系,檢測轉(zhuǎn)染后細胞培養(yǎng)體系中FOXP3的mRNA和蛋白質(zhì)表達水平,以評估3個慢病毒的干擾效果。采用干擾效果最好的慢病毒轉(zhuǎn)染上述細胞,以CCK8檢測細胞增殖、TUNEL檢測細胞凋亡、Transwell檢測細胞侵襲功能,并比較轉(zhuǎn)染前后上述指標差異。結(jié)果經(jīng)菌落PCR和測序驗證,3個FOXP3干擾慢病毒載體構(gòu)建正確;其中sh-FOXP3-1干擾效果最明顯,后期實驗均使用sh-FOXP3-1轉(zhuǎn)染。與對照組相比:2種肝癌細胞轉(zhuǎn)染后OD值均明顯下降,細胞增殖能力顯著降低;凋亡顯著升高;細胞侵襲功能顯著下降,以上差異均有統(tǒng)計學意義(P值均〈0.05)。結(jié)論實驗條件下,干擾FOXP3的表達可抑制肝癌細胞增殖、促進肝癌細胞凋亡并降低肝癌細胞侵襲能力。未來應進一步研究其作用機理,以優(yōu)化肝癌的臨床治療與預防策略。

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