非對稱小干擾RNA沉默TACC2基因對結直腸癌增殖影響的研究
摘要:目的: 本實驗探討靶向沉默TACC2基因的表達對人結直腸癌LoVo細胞增殖的影響及其主要機制。方法:采用Western blot檢測結直腸癌組織、癌旁正常組織和人結直腸癌細胞系LoVo、HCT116及SW480細胞中TACC2蛋白的表達。設計針對TACC2基因的siRNA,陰性對照siRNA-NC及三條長短不同的非對稱小干擾RNA[aiRNA(17/24),aiRNA(18/24) 及aiRNA(19/24)]。PCR檢測各組對TACC2基因的沉默效果。MTT法檢測siRNA,siRNA-NC和aiRNA(17/24)各組細胞增殖能力,流式細胞儀分別檢測3組細胞周期的變化。 結果: TACC2在結直腸癌組織中的表達明顯高于癌旁正常組織。人結直腸癌細胞系LoVo中TACC2蛋白的表達明顯高于HCT116和SW480細胞系。aiRNA(17/24)在各組中有最強的基因沉默效果。與siRNA和siRNA-NC組相比,aiRNA(17/24)組細胞增殖能力明顯降低( P 〈0.05),處于細胞周期G 2/M期的細胞數量明顯增多( P 〈0.05)。 結論: 基于TACC2基因的特異性非對稱RNA干擾在沉默效率上優于傳統siRNA,TACC2可能是治療結直腸癌的一個重要靶點。
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