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黑曲霉脂肪酶tglE的基因克隆與生化特征解析

叢珊滋; 田康明; 張新; 路福平; 王正祥 天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院; 工業(yè)發(fā)酵微生物教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 天津300457; 天津科技大學(xué)化工與材料學(xué)院; 天津300457; 北京農(nóng)學(xué)院; 農(nóng)產(chǎn)品有害微生物及農(nóng)殘安全檢測(cè)與控制北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 北京102206

摘要:從黑曲霉基因組中克隆了一種新的脂肪酶基因tglE,并在畢赤酵母中成功表達(dá)。重組酶具有典型的脂肪酶活性,其最適pH為7.0,最適溫度為40℃;在30~60℃或pH 6.5~9.0該酶的酶活力保持在60%以上;在pH 6.0~8.0或20~30℃均較為穩(wěn)定。Cu^2+、Mn^2+、Ca^2+、K^+、Mg^2+和Sn^2+對(duì)tglE有明顯的激活作用;Fe^3+、Zn^2+和EDTA對(duì)重組酶的酶活抑制作用明顯,特別是EDTA可抑制重組酶90%的活。tglE對(duì)橄欖油和C 4底物的作用最強(qiáng),對(duì)棕果油和C 16底物的作用最弱。以C 4為底物,tglE的K m值為14.40 mmol/L,V max為46.72 mmol/(mL·h)。tglE具有催化辛酸和乙醇生成辛酸乙酯的酯化活性。

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