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摘要：目的:探討建立軸向負(fù)載誘導(dǎo)小鼠椎間盤(pán)退變模型的有效方法。方法:將24只16月齡SPF級(jí)小鼠隨機(jī)分為模型組和對(duì)照組,每組12只。每日10∶00、15∶00、19∶00將模型組小鼠放入自制熱板鼠籠中,打開(kāi)熱板并設(shè)定溫度為50℃,從小鼠開(kāi)始跳躍至力竭約10min左右;對(duì)照組小鼠不做任何處理。分別于造模1個(gè)月和3個(gè)月后從模型組和對(duì)照組隨機(jī)抽取6只小鼠,采用頸椎脫臼法處死,完整取下L3~4椎間盤(pán)和L3、L4椎體,制作連續(xù)冠狀位切片后,分別行蘇木素-伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色和阿爾新藍(lán)-蘇木素(alcianblue-hematoxylin,ABH)染色,在光學(xué)顯微鏡下觀察腰椎間盤(pán)組織形態(tài)學(xué)變化,通過(guò)免疫組織化學(xué)染色法在光學(xué)顯微鏡下觀察腰椎間盤(pán)組織中Ⅱ型膠原蛋白的表達(dá)情況,并通過(guò)繪圖軟件測(cè)量椎間盤(pán)高度和軟骨終板厚度。結(jié)果:①腰椎間盤(pán)組織形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果。HE染色顯示造模1個(gè)月及3個(gè)月后,對(duì)照組腰椎間盤(pán)組織基本正常;模型組腰椎間盤(pán)組織可見(jiàn)退行性改變,其中造模3個(gè)月后較造模1個(gè)月后退變更嚴(yán)重,椎間盤(pán)纖維環(huán)出現(xiàn)裂隙,軟骨終板分層結(jié)構(gòu)紊亂、排列不規(guī)則,髓核破壞或皺縮,軟骨終板內(nèi)出現(xiàn)多個(gè)骨化中心。ABH染色結(jié)果顯示造模1個(gè)月和3個(gè)月后,對(duì)照組軟骨終板細(xì)胞排列整齊,軟骨終板細(xì)胞數(shù)目較多,軟骨基質(zhì)染色較藍(lán),部分椎間盤(pán)軟骨終板內(nèi)存在較少呈紅染的骨化中心,但骨化中心形態(tài)較小;模型組軟骨終板細(xì)胞排列混亂,細(xì)胞數(shù)目明顯減少,且軟骨基質(zhì)染色變淺,軟骨終板出現(xiàn)多個(gè)骨化中心,且骨化中心形態(tài)較大。②腰椎間盤(pán)免疫組織化學(xué)觀察結(jié)果。造模1個(gè)月和3個(gè)月后,對(duì)照組Ⅱ型膠原蛋白在髓核、纖維環(huán)內(nèi)層和軟骨終板均有陽(yáng)性表達(dá),染色較深;模型組Ⅱ型膠原蛋白的陽(yáng)性表達(dá)在髓核中央及纖維環(huán)外層較對(duì)照組明顯降低,且造模3個(gè)月后Ⅱ型膠原蛋白在髓核與纖維環(huán)外層的表達(dá)較造模1個(gè)月?

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