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高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定肉制品和調(diào)味料中7種水產(chǎn)品過(guò)敏原

孟佳; 古淑青; 方真; 鈕冰; 鄧曉軍; 郭德華; 朱堅(jiān); 韓芳 上海大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院食品工程系; 上海200444; 上海出入境檢驗(yàn)檢疫局動(dòng)植物與食品檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心; 上海200135; 安徽出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心; 安徽合肥230022

摘要：基于高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜系統(tǒng)建立了食品中水產(chǎn)品過(guò)敏原的快速篩查和定量檢測(cè)方法。樣品經(jīng)蛋白質(zhì)提取、純化、胰蛋白酶解后,利用超高效液相色譜-四極桿/靜電場(chǎng)軌道阱高分辨質(zhì)譜(UPLC-Q/Exactive-HRMS)結(jié)合ProteinPilot軟件,基于母離子和碎片離子譜分析,實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)和多肽的鑒定。再通過(guò)基本局部比對(duì)搜索工具(BLAST)與Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)比分析,篩選出南美白蝦、大閘蟹、青蟹、金槍魚、大西洋鮭魚的7種過(guò)敏原蛋白的30個(gè)特征肽。利用高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜(UPLC-QqQ-MS)系統(tǒng)對(duì)特征肽進(jìn)行驗(yàn)證和多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)定量研究。結(jié)果表明,該方法在5~250 mg/kg 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,檢出限為2~3.5 mg/kg ,平均回收率為88.7%~110.2%。該方法重現(xiàn)性好,通量高,可應(yīng)用于肉制品和調(diào)味料中7種過(guò)敏原的快速篩查和定量分析。

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