SUMO-TAT-Klf4融合蛋白的原核表達及純化
摘要：Klf4是體細胞誘導成多能干細胞的重要轉錄因子之一,參與細胞增殖分化。本研究通過將小鼠Klf4基因、穿膜肽TAT以及小分子泛素樣修飾蛋白SUMO融合并轉入大腸桿菌Rosseta(DE3)中進行表達,經PCR鑒定和酶切驗證后,用IPTG誘導后表達出約78kD的融合蛋白,利用Ni-NTA親和層析膠純化獲得了高質量的SUMO-TAT-Klf4蛋白,使用Western blotting檢測顯示特異性良好。本研究成功構建了pET3c-SUMO-TAT-Klf4原核表達載體,有利于獲得大量的Klf4蛋白,并以期提高其穿透細胞膜的能力,為后續利用重編程因子融合蛋白誘導體細胞成為iPS細胞奠定基礎。
注: 保護知識產權,如需閱讀全文請聯系基因組學與應用生物學雜志社
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