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過表達(dá)miR-101對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖和遷移的影響及可能機(jī)制

孫連碧; 曹東華; 任忠名; 王立華 65176部隊(duì)衛(wèi)勤教研室; 遼寧大連116017; 大連市婦幼保健院遺傳教研室; 遼寧大連116033

摘要:目的探討miR-101對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖、遷移的影響及可能機(jī)制。方法將卵巢癌SKOV3細(xì)胞分為miR-101模擬物組、miR-101陰性對(duì)照組及空白對(duì)照組,將miR-101模擬物轉(zhuǎn)染至miR-101模擬物組細(xì)胞,陰性對(duì)照組細(xì)胞轉(zhuǎn)染無關(guān)序列,空白對(duì)照組細(xì)胞不作任何處理,采用Real time PCR方法驗(yàn)證其轉(zhuǎn)染效率,分別用MTT方法與Transwell實(shí)驗(yàn)檢測轉(zhuǎn)染后各組SKOV3細(xì)胞的增殖與遷移能力變化。采用雙熒光素酶報(bào)告基因驗(yàn)證Girdin是否為miR-101的靶基因,Real-time PCR與Western blot實(shí)驗(yàn)分別檢測各組細(xì)胞Girdin mRNA和蛋白表達(dá)水平。結(jié)果與對(duì)照組相比,miR-101模擬物組SKOV3細(xì)胞miR-101表達(dá)水平顯著升高(P〈0.01)。與對(duì)照組相比,miR-101模擬物組SKOV3細(xì)胞增殖、遷移能力顯著降低(P〈0.01)。雙熒光素酶報(bào)告基因分析結(jié)果顯示,Girdin為miR-101的靶基因;過表達(dá)miR-101后,Girdin mRNA及蛋白表達(dá)水平顯著降低(P〈0.01)。結(jié)論 miR-101可能通過下調(diào)Girdin的表達(dá)抑制卵巢癌SKOV3細(xì)胞的增殖、遷移。

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