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橡膠樹HbMVK啟動子的克隆與缺失表達(dá)分析

胡進(jìn); 楊翠萍; 鞏笑笑; 閆冰玉; 譚玉榮; 王丹; 高璇; 張恒; 劉進(jìn)平 海南大學(xué)海南省熱帶生物資源可持續(xù)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/熱帶農(nóng)林學(xué)院; ?？?70228

摘要：為了研究橡膠MVK基因啟動子精細(xì)結(jié)構(gòu)及功能,筆者利用PCR技術(shù)對橡膠樹HbMVK基因啟動子進(jìn)行了克隆,并對其進(jìn)行了生物信息學(xué)分析。結(jié)果表明,該啟動子序列全長1 696 bp,包含CAAT-box,TATAbox,CAT-box,LTR,GARE-motif,TCA-element等元件。此外,根據(jù)元件分布,構(gòu)建橡膠樹HbMVK基因啟動子系列缺失和全長序列表達(dá)載體并轉(zhuǎn)化擬南芥。T2代轉(zhuǎn)基因擬南芥中,報(bào)告基因GUS組織化學(xué)染色結(jié)果表明：HbMVK啟動子全長序列和5＇端-1 386 bp缺失,HbMVK啟動子驅(qū)動的GUS基因只在轉(zhuǎn)基因擬南芥實(shí)生苗胚軸中有極微弱表達(dá)。5＇端-1 221 bp和-725 bp缺失,HbMVK啟動子驅(qū)動GUS基因表達(dá)的活性較強(qiáng),而5＇＇端-325bp缺失,HbMVK啟動子則完全失去活性,這表明啟動子核心調(diào)控元件位于-725 bp到-325 bp之間。

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