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摘要：以具有兩親性的疏水蛋白HGFI為基礎(chǔ),通過正負(fù)電荷的相互作用將質(zhì)粒與PEI的復(fù)合體固定在了修飾有疏水蛋白HGFI的PCL支架材料上.對不同時間段釋放的質(zhì)粒進(jìn)行了定量測量并繪制曲線,結(jié)果表明載基因支架上的基因有四分之三左右在固定的12 h內(nèi)釋放.用載基因支架進(jìn)行體外293T的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),載基因支架的轉(zhuǎn)染效率為21.76%.該轉(zhuǎn)染效率與直接用轉(zhuǎn)基因試劑對貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染的效率低很多,但對于組織工程支架來說,已具有一定的基因遞送功能.大鼠皮下埋植實(shí)驗(yàn)表明,在體內(nèi)埋植3 d后,載基因支架有著良好的體內(nèi)轉(zhuǎn)染效果,對體內(nèi)的轉(zhuǎn)基因陽性細(xì)胞進(jìn)行初步檢測發(fā)現(xiàn),支架埋植初期有大部分被轉(zhuǎn)染細(xì)胞為巨噬細(xì)胞,而對巨噬細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染是否對組織修復(fù)有益還需進(jìn)一步的研究.大鼠皮下埋植2 w后,對埋植的材料進(jìn)行血管化的檢測,組織切片進(jìn)行vWF免疫熒光染色和成像,成像結(jié)果說明載基因支架顯著地促進(jìn)了支架材料在體內(nèi)的血管新生,推測支架上固定的質(zhì)粒在體內(nèi)轉(zhuǎn)染后表達(dá)出了目的蛋白e NOS,從而促進(jìn)了支架材料周圍組織的血管化.本實(shí)驗(yàn)中,載基因支架的轉(zhuǎn)染效率還需進(jìn)一步提高,體內(nèi)轉(zhuǎn)基因陽性細(xì)胞的種類還需進(jìn)行進(jìn)一步鑒定,功能蛋白eNOS的表達(dá)和檢測還需要進(jìn)一步的研究.

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