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摘要：目的 探討利用生物打印體外構(gòu)建具有復(fù)層結(jié)構(gòu)的尿道空腔組織的可行性。方法 將7%GelMA和2%Alginate制備復(fù)合水凝膠，分別同綠色和紅色的microbeads或2×10^6 cells/mL尿道上皮細(xì)胞和尿道平滑肌細(xì)胞混勻，通過(guò)本實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)的同軸多通道打印系統(tǒng)，以10~20 μL/min的速度推進(jìn)內(nèi)、外層，以80~200 μL/min的速度推進(jìn)CaCl2，邊打印邊交聯(lián)；打印后不含細(xì)胞的空腔結(jié)構(gòu)，置于熒光顯微鏡下觀察；打印后含有細(xì)胞的組織，以尿道上皮細(xì)胞和尿道平滑肌細(xì)胞混合培養(yǎng)液于六孔板內(nèi)體外培養(yǎng)，分別于第0~7天live/dead染色檢測(cè)細(xì)胞活力，F(xiàn)-actin染色檢測(cè)細(xì)胞鋪展情況；將培養(yǎng)24 h的打印后組織，予以紅色顏料灌注。結(jié)果 復(fù)合水凝膠混合microbeads后，熒光顯微鏡下可以清楚看到內(nèi)、外雙層結(jié)構(gòu)，復(fù)層管腔的內(nèi)、外徑分別為（663.6６±51.74）μm和（976.84±63.43）μm，內(nèi)外亞層壁厚分別為（62.06±10.45）μm和（93.7８±10.25）μm。尿道細(xì)胞在第0天和第7天的細(xì)胞活力分別為84.52%和86.26%，免疫熒光染色第7天F-actin染色鋪展均勻，提示細(xì)胞鋪展生長(zhǎng)。灌注過(guò)程中，打印后空腔組織內(nèi)紅色灌注液可以順利通過(guò)管腔結(jié)構(gòu)，顏料并無(wú)外溢，管壁無(wú)破損。結(jié)論 利用復(fù)合水凝膠和同軸多通道生物打印系統(tǒng)可以初步構(gòu)建尿道空腔結(jié)構(gòu)，打印后尿道細(xì)胞可在空腔結(jié)構(gòu)內(nèi)長(zhǎng)期存活。

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