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加急見刊

一種海島棉U6啟動子在CRISPR/Cas9基因組編輯體系中的功能鑒定

藏旭陽; 代培紅; 李繼洋; 蒲艷; 劉曉東; 顧愛星 新疆農業大學農學院/新疆農業大學農業生物技術重點實驗室; 烏魯木齊830052

摘要:U6啟動子是CRISPR/Cas9基因編輯系統的重要元件之一。本研究以實驗室已克隆的海島棉U6啟動子構建GbU6-1P啟動子驅動sgRNA,構建以抗旱負調控基因GGB為靶序列的CRISPR/Cas9基因編輯載體,轉入棉花‘新海16號’原生質體中,進行功能鑒定。經酶切實驗驗證、測序、數據統計等確認GbU6-1P啟動子在基因編輯系統中的效果。結果表明,以GbU6-1P啟動子構建的CRISPR/Cas9基因編輯體系可以成功地定點編輯棉花內源靶基因GGB,引起基因突變,突變率為34.5%,突變類型全部為堿基替換。

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