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α-烯醇化酶的翻譯后修飾對(duì)類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎免疫診斷價(jià)值

王珍妮; 薛鸞; 謝君; 朱乃碩 復(fù)旦大學(xué)生物醫(yī)學(xué)研究院; 上海200433; 復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)院; 上海200433; 上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬岳陽(yáng)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院; 上海200437

摘要：探討α-烯醇化酶（α-enolase,ENO1）在類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis, RA）中的診斷意義。經(jīng)過(guò)原核表達(dá)、Ni柱純化等操作,成功得到ENO1蛋白。將純化的蛋白分別進(jìn)行瓜氨酸化及氨甲酰化修飾,得到瓜氨酸化α-烯醇化酶（citrullinatedα-enolase peptide,cit-ENO1）、氨甲酰化α-烯醇化酶（carbamylatedα-enolase peptide, carp-ENO1）以及瓜氨酸化氨甲酰化α-烯醇化酶（citrullinated-carbamylatedα-enolase peptide, cit-carp-ENO1）。選取RA患者30例（RA組）以及同期體檢正常者35例（對(duì)照組）,采用ELISA探究未修飾的蛋白以及這3種修飾后的蛋白對(duì)RA患者的診斷價(jià)值。通過(guò)SPSS軟件構(gòu)建ROC曲線對(duì)不同修飾蛋白的診斷效能進(jìn)行評(píng)估,當(dāng)cut-off值取95%的特異度時(shí),carp-ENO1的靈敏度為26.7%,cit-ENO1的靈敏度為46.7%,cit-carp-ENO1的靈敏度為63.3%。ENO1蛋白修飾之后對(duì)RA檢出率顯著提高,提示瓜氨酸化或者氨甲酰化之后的蛋白作為抗原對(duì)RA具有一定的診斷參考價(jià)值。

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