抑制鞘氨醇激酶-2活性加重血管緊張素II誘導的心肌細胞肥大
摘要：目的 本實驗旨在明確鞘氨醇激酶（sphingosine kinase，SphK）2在血管緊張素（angiotensin，Ang）II誘導的心肌細胞肥大中的作用。方法 分離并體外培養SD乳鼠心肌細胞。給予AngII（10 μmol/L）處理24h誘導心肌細胞肥大。AngII刺激時分別給予溶媒或SphK2特異性抑制劑ABC294640（1 μmol/L）共處理。采用蛋白免疫印跡法檢測心肌細胞SphK2蛋白表達。采用酶聯免疫吸附試驗（enzyme-linked immunosorbant assay，ELISA）檢測心肌細胞細胞核1-磷酸鞘氨醇（sphingosine 1-phosphate，S1P）水平。采用結晶紫染色觀察AngII誘導的心肌細胞肥大程度。采用實時定量聚合酶鏈式反應（real time-polymerase chain reaction,RT-PCR）檢測心肌細胞肥大標志基因心房鈉尿肽（atrial natriuretic peptide，ANP）、腦鈉尿肽（brain natriuretic peptide，BNP）和β-肌球蛋白重鏈（β-myosin heavy chain，β-MHC）mRNA表達水平。結果 與對照組比較，AngII處理上調心肌細胞SphK2蛋白表達和S1P濃度（均P〈0.05），并增加心肌細胞橫截面積與ANP、BNP和β-MHC mRNA表達水平（均P〈0.05）。與溶媒組比較，ABC294640處理顯著降低了心肌細胞核S1P濃度，并進一步增加了AngII處理后的心肌細胞橫截面積和肥大標志基因mRNA表達水平（均P〈0.05）。結論 抑制SphK2活性加重AngII誘導的心肌細胞肥大。SphK2有可能成為治療病理性心肌肥大的新靶點。
注: 保護知識產權,如需閱讀全文請聯系心臟雜志社
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