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小鼠藍(lán)斑內(nèi)去甲腎上腺能神經(jīng)元與中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)腹外側(cè)區(qū)谷氨酸能神經(jīng)元的聯(lián)系

趙文君; 周凱翔; 張晨; 董玉琳 第四軍醫(yī)大學(xué)人體解剖學(xué)教研室暨梁銶琚腦研究中心; 西安710032; 第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)員四大隊(duì); 西安710032; 第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)員三大隊(duì); 西安710032

摘要:目的:在v Glu T2-ires-cre小鼠腦中利用重組狂犬病毒介導(dǎo)的逆行跨單級(jí)突觸追蹤和免疫熒光組織化學(xué)染色技術(shù),研究藍(lán)斑(LC)和中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)腹外側(cè)區(qū)(vl PAG)之間的纖維聯(lián)系。方法:首先將輔助病毒注入v Glu T2-ires-cre小鼠右側(cè)vl PAG內(nèi),三周過(guò)后將重組狂犬病毒注入相同區(qū)域。一周后,在激光共聚焦顯微鏡下觀察全腦突觸前神經(jīng)元的分布;同時(shí)利用免疫熒光組織化學(xué)技術(shù),特異性標(biāo)記LC內(nèi)去甲腎上腺素能神經(jīng)元,觀察LC內(nèi)去甲腎上腺素能神經(jīng)元與狂犬病毒逆行標(biāo)記的神經(jīng)元之間的共存情況。結(jié)果:將狂犬病毒介導(dǎo)的逆行跨單級(jí)突觸病毒注入vl PAG后,腦內(nèi)大量的核團(tuán),如背內(nèi)側(cè)前額葉皮質(zhì)(dm PFC)、前扣帶回皮質(zhì)(ACC)、LC等,均可觀察到大量密集分布的突觸前神經(jīng)元。利用免疫熒光組織化學(xué)雙重染色技術(shù),觀察到LC內(nèi)存在密集分布的TH樣免疫陽(yáng)性神經(jīng)元,且部分TH陽(yáng)性神經(jīng)元同時(shí)與狂犬病毒標(biāo)記的神經(jīng)元共標(biāo),證實(shí)LC和vl PAG之間存在纖維聯(lián)系。結(jié)論:LC內(nèi)去甲腎上腺素能神經(jīng)元發(fā)出投射至vl PAG,作用于其中的谷氨酸能神經(jīng)元,該通路可能參與了鎮(zhèn)痛效應(yīng)以及慢性痛狀態(tài)下覺(jué)醒的維持。

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