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摘要：目的在體外培養(yǎng)的SH-SY5Y細(xì)胞和IMR-32細(xì)胞中,觀察microRNA-25（miR-25）對(duì)缺血/再灌注（I/R）損傷誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的作用及其可能機(jī)制。方法在體外培養(yǎng)的人SH-SY5Y細(xì)胞和IMR-32細(xì)胞中,用氧葡萄糖剝奪/再恢復(fù)（OGDR）模擬腦缺血/再灌注損傷。合成miR-25過(guò)表達(dá)片段,并構(gòu)建慢病毒載體質(zhì)粒,用脂質(zhì)體將載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)導(dǎo)入細(xì)胞中。MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力、TUNEL法檢測(cè)凋亡、RT-PCR、Real-time PCR和Western blotting分別檢測(cè)目的基因mRNA和蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果與正常培養(yǎng)組相比,OGDR組中細(xì)胞內(nèi)miR-25表達(dá)下調(diào),細(xì)胞活力明顯下降,凋亡明顯增多,同時(shí)Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表達(dá)上調(diào),Bcl-2 mRNA和蛋白表達(dá)下調(diào)（n=3,P 〈0. 05）;而與OGDR組相比,過(guò)表達(dá)miR-25組內(nèi)細(xì)胞活力明顯升高,凋亡明顯減少,同時(shí)Bax、Caspase-3mRNA和蛋白表達(dá)下降Bcl-2 mRNA和蛋白表達(dá)升高（n=3,P 〈0. 05）。結(jié)論 I/R損傷后miR-25表達(dá)上調(diào)可能通過(guò)Bax/Bcl-2-Caspase-3途徑進(jìn)而抑制I/R損傷誘導(dǎo)的凋亡,為I/R損傷的臨床治療提供潛在的治療靶點(diǎn)。

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