過表達(dá)SOX7對(duì)膽囊癌GBC-SD細(xì)胞增殖生物學(xué)特性的影響及其機(jī)制研究
摘要:目的探討過表達(dá)SOX7(Sex determining region Y-box 7)基因?qū)δ懩野〨BC-SD細(xì)胞株增殖、凋亡的影響及其可能涉及的細(xì)胞信號(hào)通路。方法用特異性的重組質(zhì)粒pc DNA3.1-SOX7作為實(shí)驗(yàn)組轉(zhuǎn)染GBC-SD細(xì)胞建立穩(wěn)定過表達(dá)SOX7基因的細(xì)胞,空載體pc-DNA3.1-mock作為對(duì)照組。采用Edu細(xì)胞熒光染色法檢測(cè)過表達(dá)SOX7基因?qū)BCSD細(xì)胞增殖的影響,同時(shí)采用Hoechst 33342細(xì)胞染色法檢測(cè)GBC-SD細(xì)胞的凋亡。Western blot檢測(cè)相關(guān)信號(hào)通路蛋白的表達(dá)。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組中SOX7 mRNA的相對(duì)表達(dá)量為(353.0±28.1)%,相對(duì)于對(duì)照組(100.0±2.3)%表達(dá)明顯增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.05)。對(duì)照組細(xì)胞在450 nm吸光度值為(4.6±0.4),較實(shí)驗(yàn)組(2.4±0.2)明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.05)。Edu免疫熒光染色結(jié)果表明,對(duì)照組細(xì)胞增殖比例(33.3±3.4)%高于實(shí)驗(yàn)組(12.2±4.2)%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.05)。Hoechst 33342細(xì)胞凋亡熒光染色結(jié)果表明,對(duì)照組細(xì)胞凋亡比例(5.2±1.3)%較實(shí)驗(yàn)組(10.2±2.4)%降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.05)。Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,對(duì)照組PTEN蛋白的相對(duì)表達(dá)量為(0.2±0.02),而實(shí)驗(yàn)組的相對(duì)表達(dá)量為(0.7±0.04),對(duì)照組磷酸化Akt的相對(duì)表達(dá)量為(0.8±0.03),而實(shí)驗(yàn)組為(0.4±0.02),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.05)。結(jié)論過表達(dá)SOX7基因能顯著抑制膽囊癌細(xì)胞GBC-SD的增殖,導(dǎo)致其凋亡增加。PTEN/Akt信號(hào)通路的激活可能與之有關(guān)。
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