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摘要：目的原核表達(dá)、純化II型登革病毒NS1A蛋白（NS1蛋白1～180氨基酸即DENV2 NS1A）,將其免疫動(dòng)物制備免疫血清并鑒定。方法構(gòu)建重組融合質(zhì)粒p ET22b-p64K-L-DENV2 NS1A,轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21（DE3）中,IPTG低溫誘導(dǎo)表達(dá)。表達(dá)的融合蛋白經(jīng)Hitrap Talon crude柱親和層析純化后,免疫雌性日本長(zhǎng)耳兔獲得抗DENV2 NS1A兔抗血清,用Western blot和免疫熒光檢測(cè)免疫血清對(duì)重組麻疹病毒MV（S191）-DENV2 NS1 6Xhis的識(shí)別和結(jié)合特性。結(jié)果重組融合質(zhì)粒p ET22b-p64K-L-DENV2 NS1A經(jīng)雙酶切和測(cè)序證明構(gòu)建正確。表達(dá)的重組融合蛋白相對(duì)分子質(zhì)量為100 000,純化后蛋白純度在85%以上,免疫獲得的抗DENV2 NS1A兔抗血清可識(shí)別重組病毒MV（S191）-DENV2 NS1 6XHis表達(dá)的DENV2 NS1蛋白。結(jié)論原核表達(dá)并純化了DENV2 NS1A蛋白,建立了基于NS1蛋白的重組病毒MV（S191）-DENV2 NS1 6XHis的Western blot和免疫熒光檢測(cè)方法,為登革熱疫苗研制中重組病毒MV（S191）-DENV2 NS1 6XHis的質(zhì)檢奠定了基礎(chǔ)。

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