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RNA結(jié)合蛋白R(shí)BM45參與DNA損傷應(yīng)答

鞏娟娟; 劉紅美; 李巍; 唐鐵山 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京兒童醫(yī)院; 北京市兒科研究所醫(yī)學(xué)遺傳中心、出生缺陷遺傳學(xué)研究北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 北京市100051; 膜生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 中國科學(xué)院動(dòng)物研究所; 北京市100101

摘要：目的探討RNA結(jié)合蛋白R(shí)BM45在DNA損傷應(yīng)答中的功能。方法提取染色質(zhì)結(jié)合蛋白后,Western印跡檢測RBM45在DNA損傷位點(diǎn)的招募情況;利用Talen技術(shù)建立RBM45敲除的細(xì)胞系后,分別利用流式細(xì)胞儀和克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測敲除RBM45對(duì)細(xì)胞周期及細(xì)胞對(duì)DNA損傷敏感性的影響。結(jié)果DNA損傷后,RBM45可以迅速地被招募到DNA損傷位點(diǎn);敲除RBM45后,Chk1磷酸化受抑制,細(xì)胞G2/M期檢驗(yàn)點(diǎn)激活受阻;并且,敲除RBM45使得細(xì)胞對(duì)DNA損傷更敏感。結(jié)論RNA結(jié)合蛋白R(shí)BM45參與DNA損傷應(yīng)答。

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