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甜櫻桃砧木PcMPK3基因啟動子的克隆及對病原菌感染的響應

趙燁; 國靜; 王甲威; 徐麗; 譚鉞; 陳新; 魏海蓉; 朱東姿; 劉慶忠; 宗曉娟 山東省果樹研究所·山東省果樹生物技術育種重點實驗室; 山東泰安271000; 山東農業大學林學院; 山東泰安271018

摘要:【目的】探明PcMPK3基因的表達調控規律。【方法】利用染色體步移技術從甜櫻桃矮化砧木Gisela 6中克隆PcMPK3基因的啟動子序列PcMPK3pro。利用Neural Network Promotor Prediction、softberry、PLACE和PlantCARE網站在線預測PcMPK3基因的基礎啟動子、轉錄起始位點和順式作用元件。將PcMPK3pro定向替換植物表達載體pBI121-SN1的CaMV35S組成型啟動子,構建重組表達載體pBI-PcMPK3pro:GUS,瞬時轉化煙草葉片。【結果】結果表明,PcMPK3pro含有啟動子核心元件TATA-box和CAAT-box等多種響應脅迫的順式作用元件。受病原菌丁香假單胞菌番茄致病變種(Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000,Pst DC3000)侵染,PcMPK3pro能驅動GUS報告基因表達且GUS酶活性顯著提高。【結論】推測PcMPK3基因參與植物響應病原菌感染的脅迫過程。

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