海洋灰綠曲霉AgveA基因響應鹽度脅迫的功能分析
摘要：通過染色體步移方法克隆了基因AgveA、AgfphA、AglreA和AglreB的上下游側翼序列,并通過逆轉錄確定了各個基因的內含子序列。通過實時熒光定量PCR發現,基因AgveA轉錄受鹽度脅迫的作用下調較明顯,而AgfphA、AglreA和AglreB上調較明顯。通過構建打靶質粒以敲除AgveA,最終成功構建了基因缺失株ΔAgveA,并從菌絲形態、菌落形態、菌絲生長速率和細胞發育表型4個方面進行了基因功能分析。結果表明,菌株ΔAgveA的菌絲形態并未產生明顯變化,而菌落的邊緣存在殘缺,菌絲生長速率在生長后期加快;細胞發育模式產生明顯改變,AgveA基因的缺失導致海洋灰綠曲霉在高鹽度脅迫條件下子囊果的合成完全受阻,而在低鹽度脅迫條件下產生分生孢子的同時也形成了極少量的子囊果。
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