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紅曲霉中桔霉素定量分析及其合成相關基因簇的研究

梁彬; 郭會; 杜欣軍; 李萍; 孫嬋嬋; 王碩 天津科技大學營養與食品工程學院; 天津300457; 南開大學醫學院; 天津300071

摘要:目的對紅曲霉中真菌毒素桔霉素進行定量分析,并研究桔霉素合成相關基因簇,為從基因水平上對桔霉素的產生進行調控、提高紅曲霉相關食品的安全性提供理論依據。方法采用高效液相色譜(HPLC)法對3株紅曲霉(紫色紅曲霉YY-1、M2,叢毛紅曲霉FJ-1)在液態發酵過程中產生的桔霉素開展定量分析,采用二代測序技術鑒定桔霉素合成基因簇的序列特征,應用實時定量聚合酶鏈式反應(RT-PCR)法進行相關基因表達水平分析。結果在固態培養和液態發酵過程中,3株紅曲霉菌體生長情況無明顯差異;在液態發酵過程中,HPLC結果顯示M2桔霉素產量最高,其次為YY-1,FJ-1產量最少;M2、YY-1、FJ-1桔霉素合成基因簇相似度達99.9%;膜轉運蛋白基因(orf5)、聚酮合酶基因(pksCT)、氧化還原酶基因(ctnB)、轉錄調節蛋白基因(ctnA)、脫氫酶基因(orf1、ctnE)六個基因表達水平在M2中最高,在FJ-1中最低。結論桔霉素的產量差異與桔霉素合成基因簇所表達酶的種類無關,而與其基因表達的調控相關。

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