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篩選地中海擬無(wú)枝酸菌無(wú)痕基因敲除菌株的簡(jiǎn)便方法

張巧巧; 金哲男; 金紅星 河北工業(yè)大學(xué)化工學(xué)院; 天津300130; 樺川縣星火鄉(xiāng)中心校; 黑龍江佳木斯154332

摘要：將抗生素抗性基因作為標(biāo)記篩選無(wú)痕基因敲除菌株比較費(fèi)時(shí),因而建立篩選無(wú)痕基因敲除菌株的簡(jiǎn)便方法。通過(guò)敲除茄紅素生物合成途徑中第一個(gè)反應(yīng)的酶編碼基因dxs（1-脫氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶基因）,獲得白色地中海擬無(wú)枝酸菌突變菌株,以此菌株為受體菌,對(duì)S-丙二酰轉(zhuǎn)移酶基因（mtf）進(jìn)行無(wú)痕敲除。針對(duì)菌落本身攜帶顏色的地中海擬無(wú)枝酸菌（橘紅色）,利用茄紅素合成酶基因dxs無(wú)痕敲除獲得了白色菌株,在此基礎(chǔ)上進(jìn)行mtf的無(wú)痕敲除。以茄紅素生物合成途徑中任意一個(gè)反應(yīng)的酶編碼基因作為標(biāo)記,很容易篩選得到無(wú)痕基因敲除的突變菌株。

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