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馬氏珠母貝4種殼色選育系RAPD反應體系優化

陳靜 劉志剛 王偉 劉鈾 楊煥章 廣東海洋大學水產學院 廣東湛江524025 廣東海洋大學農學院 廣東湛江524088

摘要:旨在篩選出馬氏珠母貝RAPD反應的最佳體系,為不同殼色馬氏珠母貝種質資源遺傳多樣性和親緣關系的研究奠定基礎。試驗以4種殼色馬氏珠母貝為材料,采用SDS法進行閉殼肌的總DNA提取并對影響RAPD擴增效果的因素進行優化。通過單因素優化篩選出最佳的25μL反應體系:10×Taqbuffer2.5μL,DNA2.0ng/μL,Mg^2+3.0mmol/L,引物0.25μmol/L,0.2mmol/LdNTP,Taq酶1.0U;反應程序:94℃預變性5min,然后進行40個循環:94℃變性45s,39℃退火60s,72℃延伸90s,最后72℃延伸10min,4℃終止反應。結果發現,采用SDS法所提取馬氏珠母貝的DNA達到RAPD反應的要求,篩選體系擴增出清晰穩定的多態性條帶,可用于對馬氏珠母貝遺傳育種方面的研究。

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