利用流式分選技術富集空載質粒轉染特定巨噬細胞的方法及條件優化
摘要：目的:建立BD FACSAria II流式細胞分選儀富集PX458 空載質粒轉染J774A.1 細胞的方法并進行技術優化,確立用于篩選J774A.1細胞的最佳條件。方法:構建PX458空載質粒轉染J774A.1細胞株,進行7-AAD染色。選擇BD FACSAria II流式細胞分選儀的100 μm噴嘴以及initial、4-way purity、purity、yield、fine tune、single cell 6種分選模式分選J774A.1細胞的GFP陽性轉染株,比較儀器各部分參數變化對分選效率的影響。結果:在儀器穩定的液流條件下,100 μm噴嘴各分選模式所得細胞純度均達80%以上,其中purity模式分選效率最高,達95.7%±1.0%。結論:使用BD FACSAria II流式細胞分選儀100 μm噴嘴分選PX458空載轉染的J774A.1細胞選擇purity分選模式最合適。
注: 保護知識產權,如需閱讀全文請聯系溫州醫科大學學報雜志社
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