保護素對原代肺成纖維細胞炎癥及纖維化增殖的影響
摘要:目的:探討保護素(PDX)對脂多糖(LPS)誘導的原代肺成纖維細胞環氧合酶-2(COX-2)表達的影響及對轉化生長因子-β1(TGF-β1)誘導其纖維化增殖轉化的影響。方法:分離、純化、鑒定得到小鼠肺成纖維細胞,用LPS誘導建立成纖維細胞體外炎癥模型,用TGF-β1誘導建立體外纖維化增殖模型。PDX分別作用于經過LPS或TGF-β1誘導的原代肺成纖維細胞。采用細胞濃度試劑盒測定細胞增殖,采用實時定量PCR測定基因表達,采用ELISA法檢測細胞上清液前列腺素E2(PGE2)水平,應用Westernblot檢測COX-2蛋白的表達。結果:采用10ng/mLTGF-β1刺激誘導體外培養的原代肺成纖維細胞48h能建立較為合理的體外纖維化增殖模型。PDX抑制LPS誘導的原代肺成纖維細胞COX-2蛋白的表達及上清液PGE2水平,同時可能通過劑量依賴方式抑制TGF-β1誘導的原代肺成纖維細胞的增殖。PDX抑制TGF-β1誘導的原代肺成纖維細胞collagen1α1、collagen1α2的合成以及α-SMA、纖連蛋白的基因表達。結論:PDX能抑制LPS誘導的小鼠原代肺成纖維細胞COX-2表達及PGE2水平,同時能抑制TGF-β1誘導的小鼠原代肺成纖維細胞纖維化增殖、膠原蛋白合成及向肌成纖維細胞轉化。
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