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摘要：目的建立弓形蟲miRNA探針定量檢測法。方法采用高通量測序技術(shù)篩選出不同弓形蟲蟲株間表達量高且差異不明顯潛在靶標,并對其不同時間點（0 d、1 d、3 d、5 d、7 d）外周血的表達及診斷效能進行研究。結(jié)果高通量測序表明, miR-252、miR-3641、miR-509-5p、miR-1285、miR-140、miR128-1、miR-191、miR-3426具有作為血液中弓形蟲生物檢測靶標的潛在性。通過對感染弓形蟲RH株和M49株小鼠的miR-191診斷效能分析后表明,敏感性分別為85%和95%,特異性均為100%。根據(jù)miR-191制備納米金探針,對不同時間點感染弓形蟲RH株和ME49株大鼠的血液靶標miR-191進行定量分析表明,感染后7 d內(nèi)感染弓形蟲miR-191表達情況相對穩(wěn)定。制作弓形蟲RH株、弓形蟲ME49株、伯氏瘧原蟲、約氏瘧原蟲、隱孢子蟲,鼠肝炎病毒和金黃色葡萄球菌感染的小鼠模型,與對照組比較分析表明,miR-191在感染弓形蟲RH株和ME49株的小鼠模型中出現(xiàn)高表達,而在感染細菌、病毒和其它寄生蟲的小鼠模型中均未出現(xiàn)表達。結(jié)論弓形蟲miR-191具有作為檢測靶標的應(yīng)用價值。

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